人大肠癌抗原基因cDNA噬菌体表达文库的构建和鉴定

来源 :细胞与分子免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:julyanjust
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目的:为获得大肠癌的特异性抗原基因,构建人大肠癌抗原基因的cDNA噬菌体表达文库。方法:从2株人大肠癌细胞CCL-187和CX-1中提取总RNA,分离纯化mRNA,并以此为模板合成第1链cDNA,用置换法合成第2链cD-NA。双链cDNA经末端削平、EcoR I接头连接、Xho I酶切、过柱分级分离,除去〈400bp片段。收集符合需要的cDNA片段与噬菌体ZAPExpress载体连接,体外包装后获得人大肠癌抗原基因的cDNA噬菌体表达文库。结果:构建的人大肠癌抗原基因的cDNA噬菌体文库,原始库容量为2.
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