【摘 要】
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目的探讨二甲氧已二酰甘氨酸(DMOG)对人牙周膜干细胞(h PDLSCs)体外成骨分化和成血管能力的影响。方法采用组织块法分离培养h PDLSCs,应用流式细胞仪进行鉴定。给予0、0.1、1
【机 构】
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安徽医科大学口腔医学院,安徽医科大学附属口腔医学院
【基金项目】
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国家自然科学基金(编号:81371114;81771117);安徽省自然科学基金(编号:1408085MKL29);安徽省科技攻关计划项目(编号:1604a0802082)
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目的探讨二甲氧已二酰甘氨酸(DMOG)对人牙周膜干细胞(h PDLSCs)体外成骨分化和成血管能力的影响。方法采用组织块法分离培养h PDLSCs,应用流式细胞仪进行鉴定。给予0、0.1、1、10、100μmol/L的DMOG处理,MTT法分析DMOG对h PDLSCs增殖能力和细胞活力影响,RTPCR检测核心结合因子2(RUNX2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、血管内皮生长因子(VEGF)基因mRNA表达,Western blot法检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、VEGF蛋白表达。成骨诱导14 d后行ALP染色及茜素红染色。结果从人牙周膜组织中分离培养的细胞经鉴定为h PDLSCs。MTT结果显示,DMOG可呈剂量依赖性地抑制h PDLSCs的增殖(P<0.05),DMOG能提高缺血清条件下h PDLSCs的细胞活力(P<0.05)。RT-PCR和Western blot结果显示,10μmol/L的DMOG可显著上调RUNX2、ALP、OCN基因mRNA表达(P<0.05),而100μmol/L的DMOG可显著上调VEGF基因mRNA和HIF-1α、VEGF蛋白水平的表达(P<0.05)。ALP和茜素红染色显示,10μmol/L的DMOG可显著促进h PDLSCs成骨分化中ALP的表达和钙结节的形成。结论DMOG通过上调HIF-1α的表达,促进h PDLSCs的成骨分化和成血管能力。
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