【摘 要】
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[目的]为探索薄壳山核桃嫁接愈合的分子机理,对CiMYB46基因进行克隆,并分析其表达模式及启动子区的诱导元件.[方法]提取薄壳山核桃芽接愈合部位不同发育时期的RNA,根据转录组
【机 构】
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南京林业大学,南方现代林业协同创新中心,南京林业大学林学院,江苏 南京 210037;江苏省中国科学院植物研究所,江苏 南京 210014;南京绿宙薄壳山核桃科技有限公司,江苏 南京,210007
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[目的]为探索薄壳山核桃嫁接愈合的分子机理,对CiMYB46基因进行克隆,并分析其表达模式及启动子区的诱导元件.[方法]提取薄壳山核桃芽接愈合部位不同发育时期的RNA,根据转录组学分析结果设置引物,通过RT-PCR进行基因克隆.以基因组DNA为模板,使用PCR方法克隆目标基因的启动子区域.[结果]克隆得到1条序列,该序列的开放阅读框(ORF)从起始密码子ATG开始,到终止密码子TAA结束共969 bp,编码322个氨基酸,所推导的氨基酸含有MYB结构域,与拟南芥中的AtMYB46聚为一类,将其命名为CiMYB46.实时定量PCR分析显示,CiMYB46在嫁接体发育的维管组织形成期具有高表达,并与部分次生壁合成相关功能基因具有共表达趋势.克隆得到CiMYB46起始密码子上游1070 bp的启动子区域,经PlantCARE分析,结果显示Ci-MYB46启动子区域具有CAAT-box及TATA-box的基本顺式作用元件和多个胁迫诱导元件,同时还具有响应包括脱落酸、茉莉酸甲酯、赤霉素、水杨酸在内的激素调控元件.[结论]CiMYB46可能与薄壳山核桃嫁接愈合过程中维管组织的形成有关,并受赤霉素诱导.
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