研究亚砷酸钠(NaAsO2)对人正常肝细胞L-02细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和细胞周期依赖激酶4(CDK4)表达的影响。
方法以0(对照)、50、100、150 μmol/L NaAsO2处理L-02细胞24 h,采用流式细胞仪检测细胞周期变化,采用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹检测Cyclin D1、CDK4 mRNA和蛋白表达水平。
结果细胞周期检测:与对照组G0-G1期[(60.33 ± 0.40)%]比较,除50 μmol/L NaAsO2组细胞比例[(54.58 ± 0.40)%]减少外,100、150 μmol/L NaAsO2组细胞比例[(64.60 ± 0.62)%、(83.13 ± 0.25)%]显著增加,差异均有统计学意义(P均< 0.05);对照组,50、100、150 μmol/L NaAsO2组S期细胞比例逐渐减少[(34.35 ± 0.30)%、(29.89 ± 0.32)%、(29.50 ± 0.44)%、(11.93 ± 0.12)%],差异均有统计学意义(P均< 0.05);对照组,50、100、150 μmol/L NaAsO2组G2-M期细胞比例[(5.32 ± 0.11)%、(15.54 ± 0.14)%、(5.90 ± 0.20)%、(4.93 ± 0.15)%]比较,差异有统计学意义(F= 908.359,P < 0.05)。Cyclin D1和CDK4检测:对照组,50、100、150 μmol/L NaAsO2组Cyclin D1 mRNA(0.48 ± 0.17、1.00 ± 0.31、1.00 ± 0.21、2.06 ± 0.53)和蛋白(0.65 ± 0.02、0.64 ± 0.05、0.71 ± 0.10、0.84 ± 0.05)表达水平比较,差异均有统计学意义(F= 167.886、46.575,P均< 0.05);对照组,50、100、150 μmol/L NaAsO2组CDK4 mRNA(1.04 ± 0.19、1.00 ± 0.21、1.29 ± 0.22、2.31 ± 0.31)和蛋白(0.67 ± 0.04、0.74 ± 0.03、0.83 ± 0.07、0.94 ± 0.04)表达水平比较,差异均有统计学意义(F= 95.171、145.848,P均< 0.05)。
结论NaAsO2通过改变细胞周期调控因子Cyclin D1、CDK4 mRNA和蛋白表达水平,使L-02肝细胞的生长周期阻滞于G0-G1期,最终导致细胞损害的发生。