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目的利用基因工程技术克隆人组织纤溶酶原激活物(t-PA)基因并构建一种能在血管内皮细胞(VEC)中高效、安全表达t-PA的pcDNA3.1(+)/t-PA真核表达重组质粒.方法采用高效Trizol试剂快速从胎儿肺组织中提取总RNA,RT-PCR获得t-PA cDNA,并将真核表达质粒pcDNA3.1(+)和t-PA基因片段分别双酶切,将回收的pcDNA3.1(+)大片段(5.0kb)与t-PA基因片段(1.9kb)重组.对pcDNA3.1(+)/t-PA质粒进行酶切鉴定和测序.脂质体介导pcDNA3.1(