饮用水中大肠埃希菌双重PCR检测方法建立

来源 :中国公共卫生 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhengziwei5
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目的 建立饮用水大肠埃希菌的双重PCR检测方法,并评价效果.方法 选取大肠埃希菌的保守序列16 SrRNA基因E-16SrDNA和乳糖操纵子LacI基因序列E-LACI作为双重PCR方法的两段扩增基因,根据GenBank上已知序列设计合成两段基因引物,使用大肠埃希菌标准菌株构建双重PCR方法.使用双重PCR方法和国标法同步检测所采集水样中的大肠埃希菌,对比评价双重PCR方法的真实性、可靠性和预测概率.确定双重PCR方法检验水样中大肠埃希菌的应用范围.结果 成功构建饮用水中大肠埃希菌检测的双重PCR方法,本方法最低检测限为40 CFU/L,灵敏度为66.7%,特异度为100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为97.7%,与国标法的一致率为97.8%.结论 本研究所建立的饮用水中大肠埃希菌双重PCR检测方法具有较高的真实性和灵敏性,适用于饮用水中大肠埃希菌的快速检验.
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