【摘 要】
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目的:旨在研究枯草芽孢杆菌来源的木聚糖酶基因在大肠杆菌BL21中高效分泌表达并对其产木聚糖酶进行酶学性质分析.方法:全基因合成枯草芽孢杆菌木聚糖酶基因序列并进行密码子优
【机 构】
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山东省药学科学院山东省生物药物重点实验室山东省多糖类药物工程实验室多糖类药物发酵与精制国家地方联合工程实验室济南250101山东农业工程学院环境科学与工程学院山东省药学科学院山东省生物药物重点实验室山
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目的:旨在研究枯草芽孢杆菌来源的木聚糖酶基因在大肠杆菌BL21中高效分泌表达并对其产木聚糖酶进行酶学性质分析.方法:全基因合成枯草芽孢杆菌木聚糖酶基因序列并进行密码子优化,经大肠杆菌BL21表达后获得基因工程菌株,通过SDS-PAGE电泳检测、硫酸铵分级沉淀和AKTA蛋白分离纯化,测定分析表达产物的酶学性质.结果:重组木聚糖酶为胞外分泌性表达,相对分子质量约43KDa;酶促反应最适温度为65℃,最适pH为10.0,最适条件下活力最高可达1201.5IU/mL.结论:成功获得高效分泌表达重组木聚糖酶的基因工程菌株,该木聚糖酶具较好的耐热性和耐碱性.
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