耐热耐碱木聚糖酶在大肠杆菌中的高效分泌表达及酶学性质研究

来源 :“生物技术与健康产业发展”研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chengmoshijing
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目的:旨在研究枯草芽孢杆菌来源的木聚糖酶基因在大肠杆菌BL21中高效分泌表达并对其产木聚糖酶进行酶学性质分析.方法:全基因合成枯草芽孢杆菌木聚糖酶基因序列并进行密码子优化,经大肠杆菌BL21表达后获得基因工程菌株,通过SDS-PAGE电泳检测、硫酸铵分级沉淀和AKTA蛋白分离纯化,测定分析表达产物的酶学性质.结果:重组木聚糖酶为胞外分泌性表达,相对分子质量约43KDa;酶促反应最适温度为65℃,最适pH为10.0,最适条件下活力最高可达1201.5IU/mL.结论:成功获得高效分泌表达重组木聚糖酶的基因工程菌株,该木聚糖酶具较好的耐热性和耐碱性.
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