重组绿脓杆菌外毒素A受体结合区蛋白的初步复性及细胞生物学活性检测

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用逐步稀释透析法将纯化的大肠杆菌表达的重组绿脓杆菌外毒素(PEA)受体结合区蛋白初步复性,复性后的可溶性蛋白用于竞争抑制PEA的细胞毒性实验。将10ng/ml的PEA与其敏感细胞L929共孵育,36h左右可见细胞发生病变死亡,而同时加入复性的重组PEA受体结合区蛋白的培养细胞孔与未加PEA阴性对照培养细胞一样仍分裂增殖,这种PEA细胞毒性抑制作用可持续到所有培养细胞老化死亡。由此可见,重组PEA受体结合区蛋白可在体外竞争抑制PEA对L929细胞的毒性,其作用机理有待进一步研究
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