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采用分子克隆技术,设计并构建来源RAW264.7巨噬细胞iNOS基因cDNA的真核表达载体。以HincⅡ+NotⅠ双酶解pKSiNOS,电泳回收3973bp编码iNOS的cDNA序列,克隆入真核表达载体pRc/CMV的HindⅢ和NotⅠ位点。用EcoRⅠ和SalⅠ酶切鉴定,初步筛选2#和8#克隆为重组子pCMViNOS。经NotⅠ和KpnI+Sa1Ⅰ酶切结果表明,重组克隆外源iNOS基因插入位点和片段大小正确。以EcoRV+XbaⅠ、EcoRV+ScaⅠ、BamHⅠ+XbaⅠ或BamHⅠ+BglⅡ双酶切