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摘要：目的 探讨胃癌患者辨证分型与血清可溶性上皮钙黏蛋白（sE-cad）水平之间的关系。方法 对190例胃癌患者进行辨证分型，采用酶联免疫吸附法检测患者血清sE-cad水平，SPSS16.0软件分析胃癌证型与血清sE-cad水平的相关性。结果 瘀血内阻证sE-cad与脾胃虚弱、胃热阴伤、气阴两虚证之间差异有统计学意义（P<0.05）。性别分层分析显示，男性瘀血内阻证与脾胃虚弱、胃热阴伤、气阴两虚证之间差异有统计学意义（P<0.05），女性脾胃虚弱证与气阴两虚证之间差异有统计学意义（P<0.05）。结论 血清sE-cad水平与胃癌患者辨证分型存在相关性。
关键词：胃癌；证型；血清可溶性上皮钙黏蛋白；相关性
胃癌是常见的恶性肿瘤之一。2009年我国城市地区病死率为21.15/10万，标化发病率为9.07/10万；农村地区病死率为35.60/10万，标化发病率为18.25/10万[1]。上皮型钙黏蛋白（E-cadherin，E-Cad）是一种重要的细胞间黏附分子，调节细胞与细胞之间以及细胞与基质之间的黏附反应，维持组织结构形态和完整性[2]。有研究表明，E-Cad基因变化与肿瘤的发生、浸润、转移有关，E-Cad基因治疗可作为胃癌治疗的靶点[3]。辨证论治是中医临床医学的精髓，证在中医治疗中占有极其重要的地位，证型更是诊治疾病的关键。因此，本研究以胃癌为基础病种，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测患者血清可溶性上皮钙黏蛋白（sE-cad）的表达水平，以期揭示胃癌患者中医证型与血清sE-cad水平之间的关系。
1 资料与方法
1.1 诊断标准
胃癌患者均经胃镜和病理诊断确诊，病理诊断参照全国胃癌防治研究协作组病理组制定的《胃及十二指肠粘膜活检病理》[4]，胃镜诊断参照《中药新药临床研究指导原则》[5]。
1.2 纳入标准
符合上述诊断标准，江苏籍原发性胃癌患者，并对研究方法知情同意。
1.3 排除标准
妊娠或哺乳期妇女及合并严重心、脑、肺、肝、肾等器官损害的患者。
1.4 中医辨证分型标准
参照《现代中医肿瘤学》[6]及2007年第2版全国高等中医院校规划教材《中医诊断学》[7]中病性辨证及脏腑辨证的相关内容辨证分为6种证型。①脾胃虚弱证：食少，腹胀，食后尤甚，或胃脘隐痛，喜温喜按，恶心欲呕，呕吐食物，大便溏薄或排便无力，或久泻，甚则五更泻，完谷不化，下肢浮肿，神疲乏力，舌淡胖或有齿痕，苔白，脉细弱或沉细。②胃热阴伤证：胃脘灼热嘈杂，食后脘痛，口干欲饮，饥不欲食，大便干结，五心烦热，舌红或绛，少苔或光剥苔，脉细数。③气阴两虚证：胃脘隐痛，神萎乏力，面色无华，形体消瘦，动则气短，自汗盗汗，口渴不多饮，舌淡，苔少，脉细无力。④湿热蕴毒证：胃脘痞闷胀痛或灼痛，恶心欲呕，口臭口渴，舌红，苔黄腻，脉滑数。⑤痰浊凝滞证：脘腹痞闷胀痛，恶心欲呕或呕吐痰涎，不欲食，或进食不畅，甚至反食夹有多量黏液，口淡不欲饮，头晕身重，便溏，面黄虚肿，舌淡，苔白腻或白滑，脉滑或缓或细缓。⑥瘀血内阻证：胃脘刺痛或如刀割，痛有定处，痛处拒按，可及肿块质硬，吐血，黑便，口唇爪甲紫黯，面色黎黑，舌紫黯或见瘀斑瘀点，脉细涩或涩。
1.5 一般资料
2008年7月-2010年7月在江苏省中医院、江苏省人民医院、中国人民解放军第八一医院采集胃癌患者190例。其中，男性140例，平均年龄（61.24±9.98）岁；女性50例，平均年龄（54.32±12.34）岁。不同性别患者的年龄差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.6 问卷调查
采用统一设计的调查表，对患者进行面访调查，调查内容包括中医四诊信息、一般人口学特征、饮食生活习惯等。
1.7 辨证质量
由1位具有中医专业知识的住院医师及1位固定的具有中医诊断专业临床经验的中医专家分别带领具有临床经验及专业知识的研究助手进行调查，并依据中医辨证分型标准进行统一辨证分型。
1.8 血清可溶性上皮钙黏蛋白水平检测
清晨收集患者空腹外周静脉血3～5 mL。血液凝固后，常规3000 r/min离心10 min分离血清，置于-70 ℃冰箱内保存。利用ELISA试剂盒（美国R&D公司，购自南京捷倍思生物技术有限公司）检测血清sE-Cad水平，严格按照说明书进行操作。酶标仪（型号POWERWAVE340）为美国Bio-Teck公司产品。
1.9 统计学方法
采用SPSS16.0统计软件进行分析。数据用—x±s表示，组间比较采用方差分析、t检验及非参数双侧检验。P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
胃癌证型、性别与相应的血清sE-cad水平见表1。胃癌患者各证型之间血清sE-cad水平比较见表2，瘀血内阻证与脾胃虚弱、胃热阴伤、气阴两虚证之间差异有统计学意义（分别为P=0.019，P=0.012，P=0.001），其余各证之间差异无统计学意义（P>0.05）。男性患者各证型间血清sE-cad水平比较见表3，瘀血内阻证与脾胃虚弱、胃热阴伤、气阴两虚证之间差异有统计学意义（分别为P=0.033，P=0.032，P=0.008），其余各证之间差异无统计学意义（P>0.05）。女性患者各证型间血清sE-cad水平比较见表4，脾胃虚弱证与气阴两虚证之间差异有统计学意义（P=0.043），其余各证之间差异无统计学意义（P>0.05）。
3 讨论
E-cad是Ⅰ型跨膜糖蛋白，主要存在于人和动物的上皮细胞，参与形成和维护正常细胞间的连接。有研究表明，组织黏膜中E-cad表达与肿瘤浸润之间存在负相关性，当E-cad表达下降或缺失，细胞间的相互黏附力下降，造成细胞容易分散而向外周浸润性生长，从而可以脱离原发灶而发生侵袭和转移[8]。而当E-cad表达降低时，其同质性黏附功能减弱，恶变细胞易于脱离原发灶，同时相对较多的E-cad播散入血，因此血清sE-cad的表达与肿瘤转移呈现正相关[9]。在胃癌早期，其转移相对较慢，而在晚期，随着胃癌浸润越深，淋巴结转移越严重[10]。因此，早期胃癌患者血清sE-cad的表达低于晚期胃癌患者。而中医认为胃癌初期邪盛而正虚不显，中晚期胃癌邪毒耗损，正气虚衰，故出现明显的虚证。所以，虚证患者sE-cad水平较实证者高。 本研究中，就胃癌总体样本而言，瘀血内阻证与脾胃虚弱、胃热阴伤、气阴两虚证之间差异有统计学意义。有文献报道，胃癌发病率具有性别差异，我国男性胃癌发病率是女性的2.05倍[11]。因此，本研究对性别进行分层。男性胃癌样本中，瘀血内阻证与脾胃虚弱、胃热阴伤、气阴两虚证之间差异有统计学意义。女性胃癌样本中，脾胃虚弱证与气阴两虚证之间差异有统计学意义。这6种证型中，脾胃虚弱、气阴两虚证属于虚证，痰浊凝滞以及湿热蕴毒证属于实证，胃热阴伤证属于虚实夹杂证，瘀血内阻证常由气虚、阴虚等导致，机体由于虚弱因而无力推动气血正常运行，所以，胃癌晚期患者常常会出现瘀血内阻这一证型，因此也常常属于虚实夹杂证。因此，考虑在虚实相同的证型中是否有其他影响血清sE-cad水平的因素，还需进一步扩大样本深入研究。瘀血内阻证作为虚实夹杂证，在胃癌总样本以及男性样本中血清sE-cad水平均高于气阴两虚证（虚）以及脾胃虚弱证（虚），考虑瘀血内阻证不仅出现于胃癌早期患者，晚期患者也常常会出现这种证型，是否受其他因素影响，也需进一步扩大样本继续研究。
参考文献：
[1] 郑朝旭，郑荣寿，陈万青.中国2009年胃癌发病与死亡分析[J].中国肿瘤，2013，22（5）：327-332.
[2] Wheelock MJ， Johason KR. Cadherins as modulators of cellular phenotype[J]. Annu Rev Cell Dev Biol，2003，19：207-235.
[3] 刘津，赵琪，张国建，等.E-Cadherin在进展期胃癌转移淋巴结中的再表达及意义[J].河北医药，2008，30（12）：1855-1857.
[4] 全国胃癌防治研究协作组病理组.胃及十二指肠粘膜活检病理[M].沈阳：辽宁人民出版社，1981：134-141.
[5] 中华人民共和国卫生部.中药新药临床研究指导原则：第二辑[S]. 1995：114-121.
[6] 陈锐深.现代中医肿瘤学[M].北京：人民卫生出版社，2003：441.
[7] 朱文锋.中医诊断学[M].北京：中国中医药出版社，2007：144.
[8] Gloushankova NA. Changes in regulation of cell-cell adhesion during tumor transformation[J]. Biochemistry（Mosc），2008，73（7）：742-750.
[9] 郭晓冬，金钢，薛志忠，等.E-Cad、MMP9血清中的表达与胃癌痰湿证型关系的临床研究[J].上海中医药杂志，2007，41（6）：20-22.
[10] Kang GH， Lee S， Kim WH， et al. Epstein-barr virus-positive gastric carcinoma demonstrates frequent aberrant methylation of multiple genes and constitutes CpG island methylator phenotype- positive gastric carcinoma[J]. Am J Pathol，2002，160（3）：787-794.
[11] 邹小农，孙喜斌，陈万青，等.2003-2007年中国胃癌发病与死亡情况分析[J].肿瘤，2012，32（2）：109-114.
（收稿日期：2013-07-19，编辑：陈静）
关键词：胃癌；证型；血清可溶性上皮钙黏蛋白；相关性
胃癌是常见的恶性肿瘤之一。2009年我国城市地区病死率为21.15/10万，标化发病率为9.07/10万；农村地区病死率为35.60/10万，标化发病率为18.25/10万[1]。上皮型钙黏蛋白（E-cadherin，E-Cad）是一种重要的细胞间黏附分子，调节细胞与细胞之间以及细胞与基质之间的黏附反应，维持组织结构形态和完整性[2]。有研究表明，E-Cad基因变化与肿瘤的发生、浸润、转移有关，E-Cad基因治疗可作为胃癌治疗的靶点[3]。辨证论治是中医临床医学的精髓，证在中医治疗中占有极其重要的地位，证型更是诊治疾病的关键。因此，本研究以胃癌为基础病种，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测患者血清可溶性上皮钙黏蛋白（sE-cad）的表达水平，以期揭示胃癌患者中医证型与血清sE-cad水平之间的关系。
1 资料与方法
1.1 诊断标准
胃癌患者均经胃镜和病理诊断确诊，病理诊断参照全国胃癌防治研究协作组病理组制定的《胃及十二指肠粘膜活检病理》[4]，胃镜诊断参照《中药新药临床研究指导原则》[5]。
1.2 纳入标准
符合上述诊断标准，江苏籍原发性胃癌患者，并对研究方法知情同意。
1.3 排除标准
妊娠或哺乳期妇女及合并严重心、脑、肺、肝、肾等器官损害的患者。
1.4 中医辨证分型标准
参照《现代中医肿瘤学》[6]及2007年第2版全国高等中医院校规划教材《中医诊断学》[7]中病性辨证及脏腑辨证的相关内容辨证分为6种证型。①脾胃虚弱证：食少，腹胀，食后尤甚，或胃脘隐痛，喜温喜按，恶心欲呕，呕吐食物，大便溏薄或排便无力，或久泻，甚则五更泻，完谷不化，下肢浮肿，神疲乏力，舌淡胖或有齿痕，苔白，脉细弱或沉细。②胃热阴伤证：胃脘灼热嘈杂，食后脘痛，口干欲饮，饥不欲食，大便干结，五心烦热，舌红或绛，少苔或光剥苔，脉细数。③气阴两虚证：胃脘隐痛，神萎乏力，面色无华，形体消瘦，动则气短，自汗盗汗，口渴不多饮，舌淡，苔少，脉细无力。④湿热蕴毒证：胃脘痞闷胀痛或灼痛，恶心欲呕，口臭口渴，舌红，苔黄腻，脉滑数。⑤痰浊凝滞证：脘腹痞闷胀痛，恶心欲呕或呕吐痰涎，不欲食，或进食不畅，甚至反食夹有多量黏液，口淡不欲饮，头晕身重，便溏，面黄虚肿，舌淡，苔白腻或白滑，脉滑或缓或细缓。⑥瘀血内阻证：胃脘刺痛或如刀割，痛有定处，痛处拒按，可及肿块质硬，吐血，黑便，口唇爪甲紫黯，面色黎黑，舌紫黯或见瘀斑瘀点，脉细涩或涩。
1.5 一般资料
2008年7月-2010年7月在江苏省中医院、江苏省人民医院、中国人民解放军第八一医院采集胃癌患者190例。其中，男性140例，平均年龄（61.24±9.98）岁；女性50例，平均年龄（54.32±12.34）岁。不同性别患者的年龄差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.6 问卷调查
采用统一设计的调查表，对患者进行面访调查，调查内容包括中医四诊信息、一般人口学特征、饮食生活习惯等。
1.7 辨证质量
由1位具有中医专业知识的住院医师及1位固定的具有中医诊断专业临床经验的中医专家分别带领具有临床经验及专业知识的研究助手进行调查，并依据中医辨证分型标准进行统一辨证分型。
1.8 血清可溶性上皮钙黏蛋白水平检测
清晨收集患者空腹外周静脉血3～5 mL。血液凝固后，常规3000 r/min离心10 min分离血清，置于-70 ℃冰箱内保存。利用ELISA试剂盒（美国R&D公司，购自南京捷倍思生物技术有限公司）检测血清sE-Cad水平，严格按照说明书进行操作。酶标仪（型号POWERWAVE340）为美国Bio-Teck公司产品。
1.9 统计学方法
采用SPSS16.0统计软件进行分析。数据用—x±s表示，组间比较采用方差分析、t检验及非参数双侧检验。P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
胃癌证型、性别与相应的血清sE-cad水平见表1。胃癌患者各证型之间血清sE-cad水平比较见表2，瘀血内阻证与脾胃虚弱、胃热阴伤、气阴两虚证之间差异有统计学意义（分别为P=0.019，P=0.012，P=0.001），其余各证之间差异无统计学意义（P>0.05）。男性患者各证型间血清sE-cad水平比较见表3，瘀血内阻证与脾胃虚弱、胃热阴伤、气阴两虚证之间差异有统计学意义（分别为P=0.033，P=0.032，P=0.008），其余各证之间差异无统计学意义（P>0.05）。女性患者各证型间血清sE-cad水平比较见表4，脾胃虚弱证与气阴两虚证之间差异有统计学意义（P=0.043），其余各证之间差异无统计学意义（P>0.05）。
3 讨论
E-cad是Ⅰ型跨膜糖蛋白，主要存在于人和动物的上皮细胞，参与形成和维护正常细胞间的连接。有研究表明，组织黏膜中E-cad表达与肿瘤浸润之间存在负相关性，当E-cad表达下降或缺失，细胞间的相互黏附力下降，造成细胞容易分散而向外周浸润性生长，从而可以脱离原发灶而发生侵袭和转移[8]。而当E-cad表达降低时，其同质性黏附功能减弱，恶变细胞易于脱离原发灶，同时相对较多的E-cad播散入血，因此血清sE-cad的表达与肿瘤转移呈现正相关[9]。在胃癌早期，其转移相对较慢，而在晚期，随着胃癌浸润越深，淋巴结转移越严重[10]。因此，早期胃癌患者血清sE-cad的表达低于晚期胃癌患者。而中医认为胃癌初期邪盛而正虚不显，中晚期胃癌邪毒耗损，正气虚衰，故出现明显的虚证。所以，虚证患者sE-cad水平较实证者高。 本研究中，就胃癌总体样本而言，瘀血内阻证与脾胃虚弱、胃热阴伤、气阴两虚证之间差异有统计学意义。有文献报道，胃癌发病率具有性别差异，我国男性胃癌发病率是女性的2.05倍[11]。因此，本研究对性别进行分层。男性胃癌样本中，瘀血内阻证与脾胃虚弱、胃热阴伤、气阴两虚证之间差异有统计学意义。女性胃癌样本中，脾胃虚弱证与气阴两虚证之间差异有统计学意义。这6种证型中，脾胃虚弱、气阴两虚证属于虚证，痰浊凝滞以及湿热蕴毒证属于实证，胃热阴伤证属于虚实夹杂证，瘀血内阻证常由气虚、阴虚等导致，机体由于虚弱因而无力推动气血正常运行，所以，胃癌晚期患者常常会出现瘀血内阻这一证型，因此也常常属于虚实夹杂证。因此，考虑在虚实相同的证型中是否有其他影响血清sE-cad水平的因素，还需进一步扩大样本深入研究。瘀血内阻证作为虚实夹杂证，在胃癌总样本以及男性样本中血清sE-cad水平均高于气阴两虚证（虚）以及脾胃虚弱证（虚），考虑瘀血内阻证不仅出现于胃癌早期患者，晚期患者也常常会出现这种证型，是否受其他因素影响，也需进一步扩大样本继续研究。
参考文献：
[1] 郑朝旭，郑荣寿，陈万青.中国2009年胃癌发病与死亡分析[J].中国肿瘤，2013，22（5）：327-332.
[2] Wheelock MJ， Johason KR. Cadherins as modulators of cellular phenotype[J]. Annu Rev Cell Dev Biol，2003，19：207-235.
[3] 刘津，赵琪，张国建，等.E-Cadherin在进展期胃癌转移淋巴结中的再表达及意义[J].河北医药，2008，30（12）：1855-1857.
[4] 全国胃癌防治研究协作组病理组.胃及十二指肠粘膜活检病理[M].沈阳：辽宁人民出版社，1981：134-141.
[5] 中华人民共和国卫生部.中药新药临床研究指导原则：第二辑[S]. 1995：114-121.
[6] 陈锐深.现代中医肿瘤学[M].北京：人民卫生出版社，2003：441.
[7] 朱文锋.中医诊断学[M].北京：中国中医药出版社，2007：144.
[8] Gloushankova NA. Changes in regulation of cell-cell adhesion during tumor transformation[J]. Biochemistry（Mosc），2008，73（7）：742-750.
[9] 郭晓冬，金钢，薛志忠，等.E-Cad、MMP9血清中的表达与胃癌痰湿证型关系的临床研究[J].上海中医药杂志，2007，41（6）：20-22.
[10] Kang GH， Lee S， Kim WH， et al. Epstein-barr virus-positive gastric carcinoma demonstrates frequent aberrant methylation of multiple genes and constitutes CpG island methylator phenotype- positive gastric carcinoma[J]. Am J Pathol，2002，160（3）：787-794.
[11] 邹小农，孙喜斌，陈万青，等.2003-2007年中国胃癌发病与死亡情况分析[J].肿瘤，2012，32（2）：109-114.
（收稿日期：2013-07-19，编辑：陈静）