目的 研究RNA干扰技术（RNAi）沉默Hedgehog（Hh）信号转导途径中核心转录因子Glil基因表达后对U251细胞增殖与凋亡以及下游因子Bcl-2、Bax、cycinD1表达的影响。方法合成、转染4对针对GlilmRNA不同位点序列的siRNA（s8、59、60、61）至人胶质瘤U251细胞．RT-PCR检测细胞Glil mRNA的表达，筛选最有效抑制Glil mRNA表达的siRNA干扰片段（siRNA-Gill）；RT-PCR、Western blotting分别检测转染SiRNA．Glil后不同时间U25l细胞Glil mRNA和蛋白的表达，确定转染干扰的时间规律；实验分为3组：siRNA-Gli1组（转染筛选后siRNA-Gli1片断）、siRNA-NC组（转染阴性对照siRNA片断1、siRNA-N组（空白对照）。RT-PCR、Western blotting分别检测各组转染48h后U251细胞cyclin D1、Bcl-2及BoxmRNA和蛋白的表达，MTT、流式细胞术分别检测细胞增殖、凋亡及细胞周期的变化。结果干扰片断58、59、60、61、NC的转染效率均达69．2％；RT—PCR检测显示转染后48h U251-60细胞无明显GlilmRNA表达，选择60作为最佳干扰片段siRNA-Glil转染U251细胞，48h时无明显Glil mRNA和蛋白表达，确定48h为转染干扰的最佳时间；转染48h后与siRNA-N和siRNA-NC组相比，siRNA-Glil组U25l细胞Bcl-2、cyclin D1 mRNA和蛋白表达下调、Boxm RNA和蛋白上调，差异均有统计学意义（P〈0．05）。MTT检测显示24、48和72h时siRNA—Glil组细胞增殖抑制率均明显高于siRNA-NC和siRNA-N组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。流式细胞术结果显示siRNA-Glil组细胞凋亡率高于siRNA-NC和siRNA-N组，差异有统计学意义（P〈0．05），且siRNA．Glil组Gl／G0期细胞比例增加，S期细胞明显减少。结论针对Glil基因设计合成的siRNA-Glil能明显抑制人胶质瘤U251细胞生长并能诱导其凋亡，其机制可能与下调cyclin D1、Bcl-2的表达，上调Bax的表达有关。