【摘 要】
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【目的】克隆梨NAC结构域蛋白基因NACP,验证其mRNA是否可以通过韧皮部进行嫁接传递。【方法】利用同源克隆的方法,分别克隆‘鸭梨’（Pyrus bretschneideri Yali）和杜梨（Pyrus be
【机 构】
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中国农业大学农学与生物技术学院果树细胞与分子育种实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(30871697);北京市自然科学基金项目(6102017);中国农业大学基本科研业务费研究生科研创新专项
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【目的】克隆梨NAC结构域蛋白基因NACP,验证其mRNA是否可以通过韧皮部进行嫁接传递。【方法】利用同源克隆的方法,分别克隆‘鸭梨’（Pyrus bretschneideri Yali）和杜梨（Pyrus betulaefolia Bunge）的NACP基因,利用生物信息学方法进行序列分析。以‘鸭梨’为接穗,杜梨为砧木进行微嫁接。从接穗茎尖、叶片、茎段韧皮部,嫁接口及砧木韧皮部、木质部组织中提取RNA,进行RT-PCR扩增。用特异的限制性内切酶ScrFⅠ对其扩增产物进行酶切鉴定。利用原位杂交技术,检测N
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