【摘 要】
：
目的构建人细胞间黏附分子1(ICAM-1)慢病毒干扰载体,包装病毒后,感染人乳腺癌细胞MCF-7并检测干扰效果。方法针对人ICAM-1基因设计并合成3条靶向短发夹RNA(shRNA)干扰序列(IC
【机 构】
：
潍坊医学院免疫学教研室,潍坊医学院附属医院血液科,潍坊市人民医院产前诊断实验室,
论文部分内容阅读
目的构建人细胞间黏附分子1(ICAM-1)慢病毒干扰载体,包装病毒后,感染人乳腺癌细胞MCF-7并检测干扰效果。方法针对人ICAM-1基因设计并合成3条靶向短发夹RNA(shRNA)干扰序列(ICAM-1 shRNA1、ICAM-1 shRNA2和ICAM-1 shRNA3)以及一个阴性对照序列(NS),将其克隆入载体p LKO.1-SP6-PGK-GFP中,测序正确后利用3个质粒病毒包装系统(干扰质粒载体-ps PAX2-p MD2.G)转染HEK293T细胞并包装慢病毒。收获病毒上清并测定病毒滴度。将所获病毒感染MCF-7细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测干扰效率。结果菌落PCR结果显示目的片段成功插入p LKO.1-SP6-PGK-GFP载体中,DNA测序证实无误。将所制备之慢病毒感染MCF-7细胞,qRT-PCR和Western blot结果证实ICAM-1 shRNA3组ICAM-1 mRNA和蛋白水平有明显下降。结论成功构建了人ICAM-1基因shRNA慢病毒干扰载体,包装慢病毒后,感染MCF-7细胞可引起ICAM-1表达下调。
其他文献
"一带一路"倡议涵盖了政策沟通、贸易畅通、设施联通、资金融通、民心沟通等五大方面,其中,贸易投资是"一带一路"互联互通合作的重中之重。为了量化沿线国家贸易投资互联互通
目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对小鼠动脉血管内皮细胞肿瘤坏死因子α受体1/核因子κB(TNFR1/NF-κB)信号通路的作用。方法以(1.2、12、120)μmol/L HSYA预处理体外培养的小
利用大型纯凝汽轮机机组的抽汽以集中供热,用底置式背压供热汽轮机替代传统的减温减压器,能够提高能源利用率,实现能量梯级利用。随着主机负荷的下降,底置式背压供热汽轮机效
全面分析总结了DZ422B定向涡轮叶片熔模铸造用型壳的制备组织模式,关键生产工序流程以及全面质量检测体系,指出了该制备技术的发展重点与方向。
目的:探讨细胞因子、Th1/Th2细胞及调节性T细胞(Treg)、转录因子Foxp3在佐剂性关节炎(AA)大鼠肺功能损害中的作用机制。方法:将24只Wistar大鼠随机分为正常对照(NC)组和模型(
以白鹤芋(Spathiphyllum cannifolium)试管苗叶柄为外植体诱导获得胚性愈伤组织,建立了胚性细胞悬浮培养系并高频率再生出植株。结果表明,最优的悬浮培养条件为:装有20 m L液
中交一航局成功开发了适合长江口工况的安全、优质、高效的海上塑料排水板打设施工工艺，成功开发、改造了多艘适合长江口工况的深水塑料排水板打设船；打设船采用在船舯设打设区
改革开放以来,广西外贸的发展取得了非常突出的成绩。但广西农产品出口主要采取的是外延式粗放型、以数量换取外汇的发展方式,出口主体规模较小、效率低、经营分散,
解决农民买书难问题是出版物发行业把服务"三农"工作落到实处,促进城乡公共文化服务均衡化发展,加快农村小康社会建设步伐的大事。本文就农民买书难症结进行了分析,并提出破
依法治军是保证部队建设稳步发展、推进强军目标的坚实基础。准确把握依法治军、从严治军的时代要求，提升部队正规化建设水平，必须牢牢把握三个着力点。$$ 强化意识，打牢依法行