分泌抗马铃薯X病毒株系特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及抗体理化性质测定

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用马铃薯X病毒(PVX)免疫的BALB/c小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,经3次克隆化后,筛选出3类分泌抗PVX株系特异性的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株,该细胞株经传代20代以上,并经液氮冻存一年以后仍表现稳定。3个杂交瘤细胞株染色体数目集中在92—102条之间,其免疫球蛋白亚类均为IgG3,用ELISA间接法测定细胞培养上清滴度为1∶320—1∶640,小鼠腹水抗体滴度为1∶102400—1∶204800,后者比兔抗血清滴度(1∶320)高300倍以上。McAb对抗原具有中和作用,中和滴度为1∶10~2。经反复冻融、硫铵沉淀和冻干后,抗体活性无明显变化。 The spleen cells of BALB / c mice immunized with potato X virus (PVX) were fused with myeloma cells (SP2 / 0). After three clones, three types of monoclonal antibodies secreting anti-PVX strains were screened (McAb) hybridoma cell line, the cell line after more than 20 passages, and after a year of liquid nitrogen frozen still stable. The chromosome numbers of the three hybridoma cell lines concentrated between 92-102, the immunoglobulin subclasses were all IgG3, and the cell culture supernatant titer was determined to be 1: 320-1: 640 by ELISA indirect method. The mouse ascites Antibody titers ranged from 1:102400 to 1:48800, which was more than 300 times higher than rabbit antiserum titers (1: 320). McAb has a neutralizing effect on the antigen, and the neutralization titer is 1:10 ~ 2. After repeated freeze-thaw, ammonium sulfate precipitation and freeze-dried, antibody activity no significant change.
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