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目的 构建谷氨酸脱羧酶GAD65基因的杆状病毒重组供体质粒，包装重组GAD65的杆状病毒，感染昆虫细胞进行表达。方法 先将已克隆的GAD65 cDNA与线性化的pFASTBACHTb进行连接，使PFAST BAC HTb-GAD65与DH10BAC感受菌进行转座重组，利用抗性及蓝白斑筛选重组Bacmid／GAD65克隆，提取Bacmid／GAD65转染昆虫细胞Sf9包装杆状病毒，利用病毒感染Sf9细胞进行蛋白表达，通过免疫荧光、SDS PAGE和Western blot检测表达情况。结果 获得了重组GAD