细菌人工染色体携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白重组体的构建

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目的构建由细菌人工染色体(BAC)携带的表达FGFl8-绿色荧光蛋白(GFP)的重组体,用于生产转基因小鼠,筛选表达FGFl8的特定细胞。方法分别克隆FGFl8基因启动子区域的5’同源臂和3’同源臂,插入到pBS.GFP.kan质粒的左右两段,构建携带FGFl8同源臂的质粒。提取含有FGFl8基因全长的bMQ-282D14BAC,转化到SWl05细菌中并筛选阳性克隆,之后再将带有FGFl8基因同源臂的pBS-GFP-Kan质粒转化到该细菌内,在42℃实现基因同源重组,将GFP基因插入到FGFl8基因的启动
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