神经生长因子诱导后的神经元样PC12细胞与成肌干细胞共培养的实验研究

来源 :中华创伤骨科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lyfqxx3
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目的 探讨神经元样PC12细胞对C3H小鼠成肌干细胞C2C12增殖与分化的影响. 方法 利用Transwell建立PC12细胞和C2C12细胞共培养体系,实验分为3组:空白对照组:C2C12细胞单独培养;实验组:C2C12细胞与已分化的PC12细胞共培养;阴性对照组:C2C12细胞与未分化的PC12细胞共培养.免疫荧光染色鉴定神经生长因子(NGF)对PC12细胞的促分化效应;流式细胞仪检测共培养条件下C2C12细胞的增殖情况;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和实时荧光定量核酸扩增(qPCR)检测与PC12细胞共培养3、7d后C2C12细胞生肌索、结蛋白基因的表达.结果 体外条件下,NGF诱导PC12细胞呈现神经元样特征:具有细长的细胞突起,并阳性表达微管相关蛋白-2.流式细胞仪检测证实:已经分化的PC12细胞抑制C2C12细胞的增殖.实验组DNA合成前期的C2C12细胞所占百分比(77.2%±0.4%)较空白对照组(71.0%±0.6%)和阴性对照组(70.8%±0.8%)高,反应增殖活力的增殖指数(22.8%±0.4%)较空白对照组(29.0%±0.6%)和阴性对照组(29.2%±0.8%)低,差异均有统计学意义(P<0.05).实验组C2C12细胞生肌素、结蛋白基因的表达高于同一培养时间其他组,差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 神经化的PC12细胞抑制C2C12细胞的增殖,但促进其分化。

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