【摘 要】
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目的 探讨真核起始因子3D(EIF3D) shRNA对乳腺癌细胞增殖、凋亡与侵袭能力的影响.方法 设计靶向EIF3D的shRNA序列,构建稳定沉默EIF3D的慢病毒载体,感染乳腺癌细胞MCF-7,同时设立阴性对照组与未处理组.qPCR和Western blot方法测定沉默效果,MTT方法测定感染后MCF-7细胞增殖能力变化,流式细胞术测定感染后MCF-7细胞凋亡率,Transwell侵袭实验检测感染后MCF-7细胞侵袭能力变化,Western blot方法测定感染后MCF-7细胞中Cyclin B1、基质
【机 构】
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辽宁省健康产业集团抚矿总医院肿瘤内二科,辽宁抚顺,113008;中国医科大学附属第一医院病理科,辽宁沈阳,110001
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目的 探讨真核起始因子3D(EIF3D) shRNA对乳腺癌细胞增殖、凋亡与侵袭能力的影响.方法 设计靶向EIF3D的shRNA序列,构建稳定沉默EIF3D的慢病毒载体,感染乳腺癌细胞MCF-7,同时设立阴性对照组与未处理组.qPCR和Western blot方法测定沉默效果,MTT方法测定感染后MCF-7细胞增殖能力变化,流式细胞术测定感染后MCF-7细胞凋亡率,Transwell侵袭实验检测感染后MCF-7细胞侵袭能力变化,Western blot方法测定感染后MCF-7细胞中Cyclin B1、基质金属蛋白酶-2 (MMP-2)与Caspase-3的表达变化.结果 感染EIF3D shRNA后,MCF-7细胞EIF3D的蛋白与mRNA表达均显著降低,提示稳定沉默EIF3D细胞株模型成功建立.沉默EIF3D能够显著抑制MCF-7细胞的增殖与侵袭能力,诱导细胞凋亡,下调Cyclin B1与MMP-2的蛋白表达,上调Caspase-3的表达(P<0.01).结论 下调EIF3D能够抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖与侵袭能力,并诱导细胞凋亡.
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