【摘 要】
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目的克隆Robol基因3’UTR的miR-218靶位点区域序列并构建“seed”区位点突变体，以便进一步研究miR-218对Robol基因的调控作用。方法通过targetscan6．2对Robol3’UTR进行分析找
【基金项目】
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国家自然科学基金（31200896）,广东省自然科学基金（$2012040007658）,广东省医学科研基金（B2012181）
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目的克隆Robol基因3’UTR的miR-218靶位点区域序列并构建“seed”区位点突变体，以便进一步研究miR-218对Robol基因的调控作用。方法通过targetscan6．2对Robol3’UTR进行分析找出miR，218靶位点，根据NCBIGenBank中RobolmRNA序列设计引物，利用RT—PCR技术从人类细胞总RNA中对包含miR-218靶位点的序列进行克隆；并设计一对突变引物，通过重叠PCR法获得“seed”区点突变基因序列；通过双荧光报告基因检测miR．218对Robol基因的调控
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