猪伪狂犬病病毒流行毒株JZ-45的分离鉴定与变异分析

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:youngyyw
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利用ST细胞从猪伪狂犬病(PR)阳性样品中分离到1株猪伪狂犬病病毒(PRV),并对其生物学特性进行鉴定,扩增该毒株gC、gE全基因,进行测序和遗传进化分析。结果显示:该毒株在ST细胞盲传2~3代后出现稳定且典型的细胞病变(CPE),经6轮空斑纯化后,测其TCID50为10-6.58/0.1 mL;接毒培养12 h后,间接免疫荧光方法检测,可在荧光显微镜下观察到特异性免疫荧光。将纯化后的病毒液接种小鼠,测其LD50为10-2.68/0.1 mL,组织病理切片分析显示死亡小鼠的心脏、肝脏、脾脏等各组织具有明显的病理损伤,将100个LD50病毒液接种家兔,2 d后接种兔子出现PR典型症状;同源性对比结果显示gC基因与国内经典、变异毒株同源性分别为99.2%~99.7%和99.9%~100.0%,与国外经典株同源性为96.0%~96.2%;氨基酸序列与国外经典株相比,在63位氨基酸位点处有连续7个氨基酸插入(AAASTPA);gE基因与国内经典、变异毒株同源性分别为96.7%%~99.4%和99.7%~99.8%,与国外经典株同源性为95.3%~97.8%;氨基酸序列与国外经典株相比,在492位氨基酸位点处有2个氨基酸插入(DG);遗传进化分析显示,该毒株的gC、gE基因与国内变异株位于同一进化分支,将该毒株命名为JZ-45。本试验研究结果为河南省PRV的流行病学遗传进化分析以及防控提供参考。
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