人参三七川芎提取物延缓内皮细胞复制性衰老的机制研究

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目的:探讨人参三七川芎提取物对内皮细胞复制性衰老(humanumbilical vein endothelial cells,HUVECs)的影响。方法:体外培养的HUVEC-2C传代至第8代,造成内皮细胞复制性衰老模型。细胞分为4组,8代衰老模型组、维生素E(Vit E)组(50 mg.L-1)、中药高、低(50,20 mg.L-1)剂量组,采用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法观察细胞衰老改变,流式细胞仪分析细胞周期,激光共聚焦显微镜观察细胞内活性氧(ROS)含量,硝酸还原酶法检测培养液一氧化氮(NO)和抗超氧阴离子水平,Western-blot法检测各组细胞AngⅡ1型和2型受体(AT1R和AT2R),NAD(P)H氧化酶p47phox的蛋白表达。结果:8代衰老模型组β-gal染色阳性细胞数明显增多,细胞停滞在G0/G1期,激光共聚焦显微镜下ROS荧光强度明显增强,培养液中抗超氧阴离子、NO含量减少,p47phox,AT1R,AT2R蛋白表达上调。给予高、低剂量中药处理后,可明显改善细胞的衰老状态,β-gal染色阳性细胞数减少,G0/G1期细胞减少,G2/M期细胞增加,ROS荧光强度减弱,抗超氧阴离子、NO含量较8代衰老模型组增加,p47phox,AT1R,AT2R蛋白表达下调,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:人参三七川芎提取物能够延缓内皮细胞复制性衰老,通过活性氧途径下调NADPH氧化酶p47phox的表达,最终使ROS产生减少;同时,中药提取物还能降低衰老内皮细胞AT1R,AT2R的表达,改善内皮功能,这可能是益气活血中药延缓内皮细胞衰老的主要原因之一。
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