【摘 要】
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将来源于采采蝇的TTI基因序列改造成大肠杆菌偏爱密码子，利用重组PCR方法获得TTI目的基因片段，在大肠杆菌中得到高效表达。经纯化获得了纯度高于98％的融合蛋白，建立了酶活测定方
【机 构】
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上海医药工业研究院创新药物与制药工艺国家重点实验室
【基金项目】
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上海市科委“强化多学科交叉合作开放和产学研结合,提高创新药物与制药工艺的整体创新能力”研发基地能力建设专项(04DZ05902,07dz22002)资助项目
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将来源于采采蝇的TTI基因序列改造成大肠杆菌偏爱密码子，利用重组PCR方法获得TTI目的基因片段，在大肠杆菌中得到高效表达。经纯化获得了纯度高于98％的融合蛋白，建立了酶活测定方法。实验证明融合蛋白具有抑制凝血酶的活性。当凝血酶浓度为10U／ml，纯化的融合TTI体积为10μl，底物浓度为250μmol／L，融合蛋白对凝血酶的抑制率为73％，确定反应类型为竞争性抑制，Ki为35μmoL／L。
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