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脂肽作为芽孢杆菌的次级代谢物质，被视为一种安全天然的抗菌物质，应用前景广泛。为了筛选出高产抗菌脂肽的芽孢杆菌并确定其最佳发酵工艺条件，研究从传统发酵豆酱中分离和鉴定产抗菌脂肽芽孢杆菌菌株，通过正交试验研究了发酵接种量、发酵填液量、发酵时间、发酵温度等发酵条件对芽孢杆菌脂肽产量的影响。结果表明：从9份东北传统发酵豆酱中分离筛选得到27株芽孢杆菌，经16S rDNA鉴定，其中6株芽孢杆菌具有合成脂肽的基因sfp、fenB和ituA。通过单位菌体脂肽产量和抑菌效果测定发现，贝莱斯芽孢杆菌SN-20和解淀粉芽孢杆菌SN-46表现优异，单位菌体脂肽产量达106和72 mg，且对革兰氏阳性和阴性指示菌均有较强的抑菌效果。正交试验发现贝莱斯芽孢杆菌SN-20最佳发酵工艺为：接种量3%，发酵填液量20%，发酵时间36h，发酵温度32℃；枯草芽孢杆菌SN-46最佳发酵工艺为：接种量2%，发酵填液量40%，发酵时间24h，发酵温度32℃；两株芽孢杆菌单位菌体脂肽产量优化前为106.11和76.23 mg/g，优化后分别提高了21.85%和23.84%，有效地增加了抗菌脂肽的提取量。