【摘 要】
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目的 探讨一氧化氮(nitric oxide,NO)诱导腰椎软骨终板退变的机制. 方法 取长枫杂种猪腰椎间盘软骨终板细胞,于含20%胎牛血清的DMEM中培养,建立体外软骨终板细胞培养模型,以
【机 构】
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广州市,南方医科大学南方医院脊柱骨病外科
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目的 探讨一氧化氮(nitric oxide,NO)诱导腰椎软骨终板退变的机制. 方法 取长枫杂种猪腰椎间盘软骨终板细胞,于含20%胎牛血清的DMEM中培养,建立体外软骨终板细胞培养模型,以光镜及苏木精-伊红染色观察其生物学表现,Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色对软骨终板细胞进行鉴定,以外源性NO-硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)2mmol/l处理软骨终板细胞、35S掺人法和3H-脯氨酸掺入法检测蛋白多糖及胶原的合成,放射性免疫测定法测炎性细胞因子IL-1B、IL-6、TNF-α的生成,碘化丙啶荧光染色及DNA片段电泳观察软骨终板细胞凋亡. 结果 原代细胞生物学性状最接近体内细胞,多次传代后细胞呈现衰老现象,经免疫细胞化学染色证实此细胞具有Ⅱ型胶原表达.施加SNP后,软骨终板细胞蛋白多糖及胶原合成明显减少(P＜0.01),炎性细胞因子含量明显升高(P＜O.01),细胞凋亡率显著增高(P＜O.01). 结论 NO抑制软骨终板细胞蛋白多糖及胶原合成,促进炎性细胞因子及细胞凋亡增加,从而促进软骨终板退变.
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