【摘 要】
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通过物种体细胞培养和长期保存,可在细胞水平上保存珍贵的种质资源。采用组织块培养法培养耳缘组织原代细胞,并通过差速消化和差速贴壁法纯化成纤维细胞并用液氮保存,细胞复
【机 构】
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甘肃省动物细胞工程技术研究中心; 西北民族大学/生物工程与技术国家民委重点实验室; 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所; 西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科技资源共享平台资助项目(2005DKA21101-29);兰州市科技计划资助项目(2006-2-59)
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通过物种体细胞培养和长期保存,可在细胞水平上保存珍贵的种质资源。采用组织块培养法培养耳缘组织原代细胞,并通过差速消化和差速贴壁法纯化成纤维细胞并用液氮保存,细胞复苏后进行了活力、形态、生长特性、微生物污染和染色体等检查。结果表明:保存了兰州大尾羊27个个体的耳缘细胞,保存的细胞平均复苏活力97.6%,生长良好,形态呈成纤维型,生长曲线呈"S"型,最大增殖浓度3.01×105个.mL-1,倍增时间为26.1h,细菌、真菌、病毒和支原体检查为阴性,染色体为2n=54,二倍体占88%。最终,成功培养并保存了兰州大尾羊耳缘组织成纤维细胞,使这一珍贵的种质资源在细胞水平上得以长期保存。
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