酵母双杂交系统筛选CLN8P相互作用蛋白

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目的 应用酵母双杂交系统筛选CLN8P相互作用蛋白质,通过对相互作用蛋白质的筛选及研究,探讨CLN8的功能,为CLN8和NCLs疾病群的发病机制研究提供线索,并为疾病的蛋白质相互作用网络提供资料.方法应用酵母双杂交技术,以pLexA-CLN8为诱饵质粒筛选人胎脑cDNA文库,得到Leu+LacZ+阳性克隆,进一步进行验证,并对验证后的阳性克隆的外源性片段进行测序及同源性分析.结果从人胎脑cDNA文库中筛选得到60个Leu+LacZ+阳性克隆;将获得的具有外源性片段的文库质粒与诱饵质粒一对一重新转入酵母体内对相互作用进行验证,共获得阳性克隆22个;对验证后阳性克隆测序并进行同源性分析,共获得不同的候选基因序列5个.结论应用酵母双杂交系统,共筛选得到5个不同的基因,其编码蛋白与CLN8P有相互作用,可能与NCLs发病机制相关。

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