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目的:克隆表达粉尘螨过敏原 Der f 13,并鉴定其免疫原性。方法提取粉尘螨总 RNA,通过 RT-PCR 获得 Der f 13的 cDNA 片段。根据已知 Der f 13序列设计出表达引物,再通过已获得的 cDNA 和引物进行 PCR 扩增,将扩增产物连接到 T 载体上并转入克隆菌 Top 10中,涂板、培养,挑选阳性菌落,LB/AMP 培养送测序。将测序正确的基因转入表达载体 PET32中,经酶切鉴定测序再转入表达菌 BL21中,表达 Derf 13蛋白,纯化、鉴定所得蛋白,并通过 Wester