【摘 要】
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目的 探讨铁死亡脂质过氧化损伤在帕金森病（Parkinson′s disease, PD）细胞模型中的作用机制，并研究Lon蛋白酶1（Lon Protease 1,LONP1）抑制脂质过氧化缓解多巴胺（Dopamine, DA）能神经细胞铁死亡的可能机制。方法 采用6-羟基多巴胺（6-OHDA）干预人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）构建PD细胞模型，CCK-8法筛选适宜造模浓度及测定细胞存活率；
【基金项目】
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新疆医科大学研究生创新创业项目（CXCY2022012）； 国家自然科学基金（82160232）；
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目的 探讨铁死亡脂质过氧化损伤在帕金森病（Parkinson′s disease, PD）细胞模型中的作用机制，并研究Lon蛋白酶1（Lon Protease 1,LONP1）抑制脂质过氧化缓解多巴胺（Dopamine, DA）能神经细胞铁死亡的可能机制。方法 采用6-羟基多巴胺（6-OHDA）干预人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）构建PD细胞模型，CCK-8法筛选适宜造模浓度及测定细胞存活率；使用LONP1基因过表达质粒转染SH-SY5Y细胞，设立正常对照（NC）组、PD组、铁死亡抑制剂（Ferrostatin-1,Fer-1）+PD组、LONP1过表达+PD组及LONP1基因空载组；倒置荧光显微镜下观察细胞形态和质粒转染情况；丙二醛（MDA）试剂盒和谷胱甘肽（GSH）试剂盒检测5组细胞内脂质过氧化产物MDA和GSH含量；Western blot检测LONP1和Nrf2/Keap1/GPX4通路蛋白表达水平。结果 （1）根据CCK-8结果选择80μM的6-OHDA干预SH-SY5Y细胞24 h制备PD细胞模型；（2）与NC组相比，PD组细胞存活率下降，MDA含量上升和GSH含量下降；与PD组相比，LONP1过表达+PD组MDA含量下降和GSH含量上升；（3）与NC组比较，PD组Keap1蛋白表达上升，Nrf2和GPX4蛋白表达下降（P＜0.05）;与PD组相比，LONP1过表达+PD组Keap1蛋白表达下降，Nrf2和GPX4蛋白表达上升（P＜0.05）。结论 LONP1能够改善DA能神经元铁依赖的脂质过氧化损伤，可能是通过影响Keap1/Nrf2/GPX4信号通路活化水平，抑制脂质过氧化缓解了DA能神经元铁死亡损伤。
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