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摘 要 建立滇姜花（Hedychium yunanense）中呋喃二萜类成分滇姜花素A的含量分析方法。方法：C18柱，流动相为水：甲醇（2∶8），流速1.0ml/min，检测波长233nm。结果：滇姜花素A的线性范围Y=1.4672X-2.8651（r=0.999），平均加样回收率98.7%，精密度RSD=2.88%（n=5）。结论：本方法简单、有效、可行，可用于滇姜花素A的含量测定。
关键词 滇姜花 滇姜花素A HPLC
滇姜花（Hedychium yunnanense）为姜科姜花属植物，民间药用以根为主，本品辛、温，具有驱风除湿、舒筋活络、调经止痛的功效。主要用于风湿痹痛，慢性腰腿痛，跌打损伤，月经不调，虚寒不孕等症。主要分布于云南［1］。目前对该民族药的质量研究有限，严启新等［2］首次报道了滇姜花的主成分姜花酮（hedychenone）的含量测定方法。基于前人的研究，作者对滇姜花中的呋喃二萜类成分滇姜花素A的含量进行测定，建立了该成分的含量分析方法，为该药材的进一步研究开发提供了依据。
1 仪器和材料
对照品为自提，经检测纯度达99%以上（归一法），实验用水为纯净水（杭州娃哈哈集团），甲醇为色谱纯（江苏汉邦科技有限公司）。
所有药材样品均采自昆明市西山区、官渡区，经昆明植物研究所童绍全研究员鉴定为滇姜花（Hedychium yunnanense）。
高效液相色谱仪DIONEX系列（德国产）包括P680二元泵、Rheodyne7725i手动进样器、UVD170U检测器、TCC-100柱温箱、25μl微量进样器，万分之一电子天平（BOSCH SAE200 日本产）。
2 方法和结果
2.1 色谱条件：色谱柱Dimension C18柱（DIKMA公司 150mm×4.6mm），柱温25℃，流动相水：甲醇（2∶8），流速1.0ml/min，检测波长233nm，保留时间19.0min。
2.2 标准曲线的绘制：精密称取对照品滇姜花素A 5.0mg定容于25ml容量瓶中，摇匀，作为储备液,分别吸取该储备液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml定容于10ml容量瓶中，按上述色谱条件进行HPLC分析。以对照品溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行回归计算，Y=1.4672-2.8651（r=0.999），表明滇姜花素A在4.0~20.0μg/ml有良好的线性关系。
2.3 检测波长测定：精密称取对照品1.0mg，用水：甲醇（2∶８）溶解，并定容于10ml容量瓶中，摇匀，以水：甲醇（2∶[KG-*5］8）作空白对照，在200~400nm进行扫描，可见在233nm处有最大吸收，故检测波长选定为233nm。
2.4 样品溶液的制备：精密称定滇姜花药材粉末（过40目筛）100mg，以30ml甲醇回流提取2小时，提取液过滤，滤液加甲醇定容至50ml，摇匀，吸取8ml，定容至10ml，作为样品测定液。
2.5 精密度考察：精密吸取对照品溶液25μl（μg/ml），重复进样5次，测定吸收峰面积，RSD=2.88%，结果表明精密度良好。
2.6 重复性实验：取同一滇姜花药材末5份，精密称定，按“样品含量测定”项下操作，以2.1项的色谱条件测定，计算含量，RSD=3.6%。
2.7 稳定性考察：精密吸取同一样品溶液，分别在0，2，4，6，8，10，12，20，24小时测定，峰面积积分计算RSD=2.2%。
2.8 加样回收实验：精密称取已知含量的药材粉末100mg，共7份，分别加入对照品溶液0.8ml(０.5mg/ml)，结果见表1。对照品平均加样回收率98.7%，表明分析方法准确。
2.9 样品含量测定：吸取2.4项下样品测定溶25μL，进行HPLC测定，记录峰面积，外标法计算含量，滇姜花素A的含量为0.413%。
3 讨论
滇姜花素A为呋喃二萜类成分，初步药理研究表明具有抗肿瘤活性［3，4］，通过药材中滇姜花素A的含量研究，建立了该组分的含量分析方法，且方法简单、有效、可行，该分析方法的建立，在今后的滇姜花药物资源开发利用方面具有重要的参考价值，为滇姜花的系统研究打下了基础。
参考文献
1 中国科学院昆明植物研究所.云南植物志.北京：教育科学出版社，1997.11
2 严启新，叶晓雯，赵庆，等.滇姜花中姜花酮的含量测定.中国中药杂志，2005，30(20)：1593．
3 赵庆，郝小江，陈耀祖，等.滇姜花中新二萜成分研究.高等学校化学学报，1995，16（1）：64．
4 赵庆，郝小江，陈耀祖，等.滇姜花抗肿瘤活性二萜及其光敏氧化反应的研究.植物学报，1999，41（5：）528．
(收稿日期：2007年1月14日)
关键词 滇姜花 滇姜花素A HPLC
滇姜花（Hedychium yunnanense）为姜科姜花属植物，民间药用以根为主，本品辛、温，具有驱风除湿、舒筋活络、调经止痛的功效。主要用于风湿痹痛，慢性腰腿痛，跌打损伤，月经不调，虚寒不孕等症。主要分布于云南［1］。目前对该民族药的质量研究有限，严启新等［2］首次报道了滇姜花的主成分姜花酮（hedychenone）的含量测定方法。基于前人的研究，作者对滇姜花中的呋喃二萜类成分滇姜花素A的含量进行测定，建立了该成分的含量分析方法，为该药材的进一步研究开发提供了依据。
1 仪器和材料
对照品为自提，经检测纯度达99%以上（归一法），实验用水为纯净水（杭州娃哈哈集团），甲醇为色谱纯（江苏汉邦科技有限公司）。
所有药材样品均采自昆明市西山区、官渡区，经昆明植物研究所童绍全研究员鉴定为滇姜花（Hedychium yunnanense）。
高效液相色谱仪DIONEX系列（德国产）包括P680二元泵、Rheodyne7725i手动进样器、UVD170U检测器、TCC-100柱温箱、25μl微量进样器，万分之一电子天平（BOSCH SAE200 日本产）。
2 方法和结果
2.1 色谱条件：色谱柱Dimension C18柱（DIKMA公司 150mm×4.6mm），柱温25℃，流动相水：甲醇（2∶8），流速1.0ml/min，检测波长233nm，保留时间19.0min。
2.2 标准曲线的绘制：精密称取对照品滇姜花素A 5.0mg定容于25ml容量瓶中，摇匀，作为储备液,分别吸取该储备液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml定容于10ml容量瓶中，按上述色谱条件进行HPLC分析。以对照品溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行回归计算，Y=1.4672-2.8651（r=0.999），表明滇姜花素A在4.0~20.0μg/ml有良好的线性关系。
2.3 检测波长测定：精密称取对照品1.0mg，用水：甲醇（2∶８）溶解，并定容于10ml容量瓶中，摇匀，以水：甲醇（2∶[KG-*5］8）作空白对照，在200~400nm进行扫描，可见在233nm处有最大吸收，故检测波长选定为233nm。
2.4 样品溶液的制备：精密称定滇姜花药材粉末（过40目筛）100mg，以30ml甲醇回流提取2小时，提取液过滤，滤液加甲醇定容至50ml，摇匀，吸取8ml，定容至10ml，作为样品测定液。
2.5 精密度考察：精密吸取对照品溶液25μl（μg/ml），重复进样5次，测定吸收峰面积，RSD=2.88%，结果表明精密度良好。
2.6 重复性实验：取同一滇姜花药材末5份，精密称定，按“样品含量测定”项下操作，以2.1项的色谱条件测定，计算含量，RSD=3.6%。
2.7 稳定性考察：精密吸取同一样品溶液，分别在0，2，4，6，8，10，12，20，24小时测定，峰面积积分计算RSD=2.2%。
2.8 加样回收实验：精密称取已知含量的药材粉末100mg，共7份，分别加入对照品溶液0.8ml(０.5mg/ml)，结果见表1。对照品平均加样回收率98.7%，表明分析方法准确。
2.9 样品含量测定：吸取2.4项下样品测定溶25μL，进行HPLC测定，记录峰面积，外标法计算含量，滇姜花素A的含量为0.413%。
3 讨论
滇姜花素A为呋喃二萜类成分，初步药理研究表明具有抗肿瘤活性［3，4］，通过药材中滇姜花素A的含量研究，建立了该组分的含量分析方法，且方法简单、有效、可行，该分析方法的建立，在今后的滇姜花药物资源开发利用方面具有重要的参考价值，为滇姜花的系统研究打下了基础。
参考文献
1 中国科学院昆明植物研究所.云南植物志.北京：教育科学出版社，1997.11
2 严启新，叶晓雯，赵庆，等.滇姜花中姜花酮的含量测定.中国中药杂志，2005，30(20)：1593．
3 赵庆，郝小江，陈耀祖，等.滇姜花中新二萜成分研究.高等学校化学学报，1995，16（1）：64．
4 赵庆，郝小江，陈耀祖，等.滇姜花抗肿瘤活性二萜及其光敏氧化反应的研究.植物学报，1999，41（5：）528．
(收稿日期：2007年1月14日)