【摘 要】
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【目的】探索建立以G418抗性为筛选标记的农杆菌介导的深绿木霉遗传转化方法,为木霉菌突变菌株的筛选和基因功能研究奠定基础。【方法】测试供试野生型深绿木霉菌菌株T23对G4
【机 构】
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阜阳师范学院生命科学学院,上海交通大学农业与生物学院
【出 处】
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西北农林科技大学学报(自然科学版)
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31440025,41001189);安徽省自然科学基金项目(1408085MC44);阜阳师范学院科技成果孵化基金项目(2013KJFH04);安徽省大学生创新创业训练计划项目(AH201310371046,AH201310371047)
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【目的】探索建立以G418抗性为筛选标记的农杆菌介导的深绿木霉遗传转化方法,为木霉菌突变菌株的筛选和基因功能研究奠定基础。【方法】测试供试野生型深绿木霉菌菌株T23对G418的敏感性,构建以G418抗性为筛选标记的质粒载体p1300-neo,并将该质粒通过农杆菌导入深绿木霉T23菌株中,利用G418抗性平板筛选获得转化子,通过PCR对稳定转化子进行鉴定。【结果】T23菌株对G418具有高度敏感性,25μg/mL G418可完全抑制T23菌株的生长;构建的p1300-neo载体是可行的G418抗性标记,通过
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