考马斯亮蓝法测定分子伴侣GroEL含量及优化

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目的:研究不同条件对测定蛋白质浓度过程中影响.方法:以分子伴侣GroEL为研究对象,利用蛋白质与考马斯亮蓝显色原理,测定蛋白质含量,并对测定条件进行优化.实验结果:考马斯亮蓝和蛋白的复合物在595nm处有最大吸收,反应2~5min蛋白和染料结合恒定,20℃孵育测量对实验影响较小,蛋白质含量受SDS干扰.测定所用的标准曲线方为:y=0.0144x+0.0592.结论:本文从多方面探究了外界因素对其影响,发现采用考马斯亮蓝测定蛋白质浓度、时间、温度、干扰剂等都是影响实验结果准确性的重要因素.
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