构建Cx43特异性shRNA真核表达载体及体外干扰效率的鉴定

来源 :中西医结合研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:minyii
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目的本研究前期研究结果表明Cx43与穴位、经脉之间存在着密切联系,为了进一步研究Cx43在针刺活动中的作用,我们应用RNA干扰技术首先构建针对Cx43基因的特异性shRNA(small hairpin RNA)真核表达载体,并转染体外培养的NIH/3T3细胞,观察其对Cx43基因的沉默效果,从而挑选出一条能有效沉默Cx43表达的shRNA,为进一步在体研究作准备。方法针对大、小鼠Cx43 mRNA同源序列的两个靶点,体外合成两对互补的寡核苷酸链。经退火连接形成双链,插入到PGenesil-1真核表达载体。
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