【摘 要】
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目的：小陷胸汤是一种潜在的治疗癌症的有效药物，前期临床研究表明，小陷胸汤具有明显的抗癌作用。然而，其通过上皮间质转化（Epithelial-Mesenchymal Transformation， EMT）抑制侵袭转移治疗胃癌的能力尚不清楚。本研究旨在探讨小陷胸汤对TGF-β1诱导胃癌MGC-803细胞侵袭转移及上皮间质转化的影响，并探讨其可能的机制。方法：通过CB-DOCK在线平台（ http:
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（81573864）；
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目的：小陷胸汤是一种潜在的治疗癌症的有效药物，前期临床研究表明，小陷胸汤具有明显的抗癌作用。然而，其通过上皮间质转化（Epithelial-Mesenchymal Transformation， EMT）抑制侵袭转移治疗胃癌的能力尚不清楚。本研究旨在探讨小陷胸汤对TGF-β1诱导胃癌MGC-803细胞侵袭转移及上皮间质转化的影响，并探讨其可能的机制。方法：通过CB-DOCK在线平台（ http: / /clab. labshare. cn /cb-dock /）预测小陷胸汤与活化T细胞核因子（Nuclear Factor of Activated T Cells， NFAT）分子对接。使用浓度为10 μg·L-1的转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1，TGF-β1)建立人胃癌MGC-803细胞侵袭转移模型，将MGC-803细胞分为空白组、模型组、小陷胸汤 (0.1 g·L-1)组、小陷胸汤 (0.2 g·L-1)组和小陷胸汤 (0.4 g·L-1)组，为进一步探讨WNT5A/Ca2+/ NFAT信号通路在小陷胸汤抑制胃癌中的关键参与作用，将WNT5A过表达质粒转染MGC-803细胞，分为空白质粒组、WNT5A-OE组、空白质粒+小陷胸汤 (0.4 g·L-1)组和WNT5A-OE +小陷胸汤 (0.4 g·L-1)组。分别使用CCK-8法、Transwell小室实验、划痕愈合实验、免疫印迹法（Western Blotting，WB）、免疫荧光法检测MGC-803细胞活力、侵袭能力、迁移能力、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、锌指蛋白（Snail）、WNT5A/Ca2+/NFAT信号通路关键蛋白WNT5A、钙调神经磷酸酶 （calcineurin，CaN）、NFAT1、p-NFAT1和NFAT1核蛋白表达以及细胞Ca2+浓度变化。结果：分子对接提示小陷胸汤作用于WNT5A/Ca2+/NFAT信号通路。与模型组相比，小陷胸汤(0.1， 0.2， 0.4 g·L-1)能显著促进MGC-803细胞活力的丧失，可通过基质凝胶侵入Transwell下室抑制细胞，并以剂量依赖性的方式减缓细胞划痕愈合，并促进E-cadherin的表达，抑制N-cadherin、Vimentin和Snail的表达（P<0.05，P<0.01）。进一步实验表明，与模型组相比，小陷胸汤可以抑制WNT5A、CaN、NFAT1和p-NFAT1的表达，降低NFAT1核表达和NFAT1介导的转录活性，从而降低细胞Ca2+浓度，且可逆转WNT5A的作用（P<0.05，P<0.01）。结论：小陷胸汤可通过WNT5A/Ca2+/NFAT通路减弱人胃癌MGC-803细胞的侵袭转移和EMT，从而减弱TGF-β1诱导的促瘤作用。这提示小陷胸汤可能通过调节胃癌的侵袭、转移和EMT来预防和治疗胃癌。
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