【摘 要】
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由黄海底泥分离得到1株能够稳定高产蛋白酶的菌株,命名为HW08.对该菌株进行形态特征、生理生化分析表明,其为革兰氏阴性杆菌,极生单鞭毛,非发酵型,严格需氧,细胞内不积累多羟
【机 构】
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中国海洋大学医药学院,山东青岛,266003;黄海水产研究所海洋产物资源与酶工程实验室,山东青岛,266071
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由黄海底泥分离得到1株能够稳定高产蛋白酶的菌株,命名为HW08.对该菌株进行形态特征、生理生化分析表明,其为革兰氏阴性杆菌,极生单鞭毛,非发酵型,严格需氧,细胞内不积累多羟基丁酸作为储藏碳源,氧化酶阴性.将该菌16S rDNA序列(GenBank登录号FJ999660)和假单胞菌属中模式菌株16S rDNA序列进行比对,构建系统发育树,将其确定为Pseudomonas lundensis.分离纯化得到该菌分泌的蛋白酶Ps5,SDS-PAGE电泳显示其分子量为46kDa.Ps5的最适作用条件为pH10.4,温度30℃;其活性被EDTA显著抑制,表明Ps5属于金属蛋白酶家族.以AAPF为底物,测定Ps5酶动力学参数,计算表明Km为1.17 mM,最大反应速率Vmax为0.32μmol/min.
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