【摘 要】
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目的 利用噬菌体展示技术,从噬菌体随机十二肽库中筛选出能够特异性结合MDA-MB-231乳腺癌细胞的噬菌体克隆.方法 以人正常乳腺细胞为减性筛选细胞、MDA-MB-231乳腺癌细胞为靶细胞,对噬菌体随机十二肽库进行筛选,挑取富集后的阳性单克隆噬菌体,酶联免疫吸附试验(ELISA)及DAB染色鉴定阳性噬菌体的特异性及亲和力.结果 经过3轮筛选,噬菌体得到约113倍的富集,随机挑选11株单克隆噬菌体,
【机 构】
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266021青岛大学医学院，中山大学华南肿瘤学国家重点实验室,271000泰安市中心医院乳腺外科,中山大学华南肿瘤学国家重点实验室,中山大学微生物教研室,中山大学高血压研究所,中山大学华南肿瘤学国家重
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目的 利用噬菌体展示技术,从噬菌体随机十二肽库中筛选出能够特异性结合MDA-MB-231乳腺癌细胞的噬菌体克隆.方法 以人正常乳腺细胞为减性筛选细胞、MDA-MB-231乳腺癌细胞为靶细胞,对噬菌体随机十二肽库进行筛选,挑取富集后的阳性单克隆噬菌体,酶联免疫吸附试验(ELISA)及DAB染色鉴定阳性噬菌体的特异性及亲和力.结果 经过3轮筛选,噬菌体得到约113倍的富集,随机挑选11株单克隆噬菌体,ELISA显示8号噬菌体单克隆对乳腺癌细胞的亲和力是对照的6.5倍,DAB鉴定亦显示其对乳腺癌细胞的特异性及亲和力最高,命名为LK-8.结论 利用噬菌体筛选技术成功筛选出能够特异性结合MDA-MB-231乳腺癌细胞的特异性噬菌体单克隆LK-8,可为进一步合成特异性多肽用于早期诊断和靶向治疗乳腺癌奠定基础。
其他文献
长链非编码RNA (IncRNA)是重要的基因表达调控因子,它广泛参与多种生理及病理过程.近年来研究证实IncRNA与肿瘤密切相关,并显露出作为肿瘤诊断和治疗新靶点的潜能。
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假基因是指基因组中与正常编码蛋白基因序列相似,但缺乏明确生理功能的基因序列.近年来研究表明,许多假基因在肿瘤中能够活跃转录并翻译蛋白,在遗传水平、转录水平和转录后水平调控基因的表达活性,然而其功能及作用机制还有待进一步探索。
maspin是一种抑癌基因,属于丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族成员,能抑制肿瘤细胞生长、侵袭和转移,促进肿瘤细胞凋亡,影响肿瘤血管生成以及增加化疗敏感性.对maspin靶向治疗肿瘤的机制深入研究可为肿瘤治疗提供新的思路。
M2型丙酮酸激酶(PKM2)是糖酵解途径的一个关键限速酶,在多种恶性肿瘤细胞中高表达.在肿瘤糖代谢通路中,PKM2可以通过在高活性的四聚体和低活性的二聚体之间相互转化,促进肿瘤的糖酵解和细胞增殖.肿瘤细胞通过多种方式调节PKM2的表达和酶活性如转录调节、变构调节和翻译后修饰调节.PKM2在肿瘤发生和肿瘤代谢中的重要作用使它有望成为肿瘤治疗的新靶点。
微小RNA(miRNA)是一类小分子的非编码RNA,已发现这类RNA在乳腺癌中可扮演癌基因和抑癌基因的角色,在肿瘤侵袭转移级联反应各阶段也起到促进或者抑制作用,与肿瘤的上皮-间质转化及肿瘤干细胞的生成也高度相关.最新研究表明,miRNA可作为肿瘤诊断预后的一项重要指标,为靶向miRNA生物治疗方式作用于乳腺癌临床诊断治疗提供了理论依据。
食管癌的高侵袭性与血管生成密切相关,并伴随微血管密度、血管内皮生长因子、血管生成相关因子及其受体表达水平的改变.研究发现,血清中高水平的血管生成相关因子与食管癌患者疗效不佳及预后不良密切相关,提示其可作为食管癌治疗的新靶点,值得进一步深入探索。
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高良姜素是一种从高良姜的根茎中提取的天然黄酮类化合物,是高良姜中重要的药用成分.大量研究表明,高良姜素具有多种生物活性,发现它有多种抗肿瘤机制,包括抗增殖、促凋亡、促自噬、以及抑制肿瘤细胞的转移等。