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根据从基因组DNA扩增到的梅花‘南京红须'类黄酮3'-羟化酶基因片段(469 bp)设计3条嵌套的特异性引物,与6条短的随机简并引物组成的引物库分别用热不对称交错PCR法从‘南京红须'基因组DNA扩增该片段的5'和3'旁侧序列.获得的5'和3'旁侧序列分别长1 443 bp和1 200 bp.将两个旁侧序列在469bp片段的基础上拼接得到‘南京红须'全长为2 144 bp的类黄酮3'-羟化酶基因,被命名为pmhxF3'H.序列