【摘 要】
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目的 探讨红花多糖(safflower polysaccharide,SPS)调控巨噬细胞极化对黑色素瘤细胞迁移与侵袭能力的影响与分子机制.方法 SPS作用巨噬细胞后的上清作为条件培养基(condition
【机 构】
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200437,上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院临床免疫研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金（81673669,81703782,81973543）;上海市交叉学科“中医临床免疫学”建设项目（30304113598）;上海市中医药三年行动计划ZY(2018-2020)-CCCX-2004-09）;上海市“科技创新行动计划”（19401901600）;2020年上海中医药大学校级“研究生创新培养样专项”（JY611.02.03.74）
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目的 探讨红花多糖(safflower polysaccharide,SPS)调控巨噬细胞极化对黑色素瘤细胞迁移与侵袭能力的影响与分子机制.方法 SPS作用巨噬细胞后的上清作为条件培养基(conditioned medium,CM)用于对黑色素瘤细胞活力变化、迁移与侵袭影响的实验.CCK-8法检测SPS及CM的细胞毒性.划痕实验与Transwell侵袭实验检测SPS及CM对B16-F10黑色素瘤细胞迁移能力与侵袭能力的影响.普通光学显微镜观察巨噬细胞形态学变化.荧光定量PCR法检测M1型巨噬细胞极化相关分子(TNF-α、CD86、iNOS、IL-12)及M2型巨噬细胞极化相关分子(Arg-1、CD206)的mRNA表达;ELISA法检测上清中巨噬细胞极化相关细胞因子IL-1β与IL-10的分泌情况;流式细胞术检测巨噬细胞极化表型;荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹法检测Notch1、Jagged1的mRNA和蛋白表达水平.结果 SPS对B16-F10黑色素细胞及Raw264.7巨噬细胞均无毒性作用.SPS对B16-F10黑色素瘤细胞的侵袭与迁移能力均无抑制作用,但其作用巨噬细胞后的CM可显著抑制黑色素瘤细胞的细胞活力、侵袭与迁移能力.SPS作用巨噬细胞后,其形态呈M1样改变,M1型巨噬细胞极化相关分子TNF-α、CD86、iNOS、IL-12的mRNA水平升高,巨噬细胞上清中IL-1β增多,M2型巨噬细胞极化相关分子Arg-1、CD206的mRNA表达无明显变化,巨噬细胞上清中IL-10含量无明显变化.SPS可显著提高巨噬细胞内Notch1、Jagged1 mRNA和蛋白的表达.结论 SPS可能通过上调Notch1信号通路调控巨噬细胞向M1型极化抑制黑色素瘤细胞的侵袭与迁移.
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