【摘 要】
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目的研究曲细精管微注射法建立转基因小鼠的可行性.方法选取人巨细胞病毒启动子调控的增强型绿色荧光蛋白(pCMV-EGFP)表达载体,应用体视解剖镜和显微注射仪将不同剂量的被脂
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目的研究曲细精管微注射法建立转基因小鼠的可行性.方法选取人巨细胞病毒启动子调控的增强型绿色荧光蛋白(pCMV-EGFP)表达载体,应用体视解剖镜和显微注射仪将不同剂量的被脂质体包裹的质粒DNA注射到不同年龄的KM小鼠曲细精管内.在注射后40 d左右,雄鼠与雌鼠合笼交配;分娩后3周,剪取仔鼠尾,提取基因组DNA,应用PCR、Southem blotting技术进行整合检测.处死2只首建小鼠,荧光显微镜观察组织冰冻切片中EGFP的表达.结果共注射41只雄性小鼠,存活34只,其中32只具有交配、受精能力,获得仔
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