运用CRISPR/Cas9技术敲除人源黏着斑蛋白基因

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cbxabc
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:建立CRISPR/Cas9n系统,用于敲除人源黏着斑蛋白(VCL)基因。方法:设计一个靶向人源VCL基因第3个外显子的单向导RNA(sgRNA),分别克隆表达载体后,通过慢病毒转入人MDA-MB-231细胞,通过PCR及Western印迹检测细胞株中VCL基因的敲除效果。结果:测序结果显示靶向VCL基因CRISPR/Cas9重组质粒构建成功;PCR产物测序结果表明本次设计的Cas9/sgRNA能够对VCL基因进行编辑敲除;Western印迹显示Cas9-VCL组的MDA-MB-231细胞内VCL表达
其他文献
目的探讨非AIDS患者肺隐球菌病感染的临床特征,比较有无基础疾病的肺隐球菌病患者临床与病理学特征,以提高早期诊断准确率。方法本研究回顾性分析2009年1月-2012年11月间收治
研究了全分布无结构P2P(peer-to-peer)网络拓扑的最优化问题.通常认为,无结构P2P网络拓扑属于Power-Law结构.然而,Power-Law并非对所有应用都是最好的选择.首先研究了无结构P2P覆盖
目的探讨影响心脏骤停后心肺复苏自主循环综合征患者预后的相关因素,为临床上预后评估提供依据。方法收集2013—2015年入住我院急诊重症监护室成功心肺复苏自主循环200例,除去
病历资料患者,男性,41岁,因“HIV 确认阳性1月余,腹泻、纳差1周,发热3天”入院。患者1月前于当地疾控中心行 HIV 确认实验阳性,CD +4细胞计数为126个/ul,未行 HAART。入院前1周,患者无
目的:建立快速、灵敏测定大鼠血浆中5-羟基-7-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1-苯基-3-庚酮(DPHA)的LCMS/MS方法。方法:血浆样品经正己烷萃取后进行分析,采用Kinetex XB-C18色谱柱(2.10 mm&#
期刊
前列腺病能预防吗?编辑同志:前不久因病住院期间,我亲眼目睹了不少前列腺病患者痛苦的样子,真怕自己将来也会得此类疾病。请问,前列腺病能预防吗?83360部队何新军何新军同志:男性进入中年
施工阶段的成本控制是施工企业能否有效进行项目成本控制的关键。但目前我国施工企业在施工阶段的成本控制中还存在许多问题。针对于这些问题,本文提出了施工阶段成本控制的方
目的:初步建立基于纳米磁珠偶联培养滤液蛋白10(CFP-10)特异性单抗富集结核分枝杆菌的方法。方法:大肠杆菌表达CFP-10抗原,采用鼠杂交瘤技术制备相应的CFP-10单抗,用NHS修饰