【摘 要】
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目的 利用RNAi技术特异性抑制食管癌EC109细胞株叶酸受体α(folate receptor α,FRα)mRNA 表达,研究其对EC109细胞株体外增殖能力的影响.方法 化学合成针对FRα基因3个不同
【机 构】
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汕头大学医学院第一附属医院消化内科,广东,汕头,515041
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目的 利用RNAi技术特异性抑制食管癌EC109细胞株叶酸受体α(folate receptor α,FRα)mRNA 表达,研究其对EC109细胞株体外增殖能力的影响.方法 化学合成针对FRα基因3个不同靶点的3条FRαsiRNA(FRαsiRNA1,FRαsiRNA2和FRαsiRNA3),分别转染EC109细胞株,以未转染细胞为正常对照,转染阴性siRNA的细胞为阴性对照.免疫印迹法检测FRα蛋白表达,CCK8法检测RNA干扰后24,48,72,96 h细胞增殖,流式细胞仪检测RNA干扰后24,48,72,96 h细胞凋亡.结果 免疫印迹法提示FRαsiRNA1组FRα表达为正常对照组的14.7%;FRαsiRNA2组FRα表达为正常对照组的55.1%;FRαsiRNA3组FRα表达为正常对照组的62.9%;干扰后24,48,72,96 h细胞存活率均降低,分别为(81.15±1.97)%,(68.18±3.45)%,(49.82±7.64)%,(32.92±2.61)%.干扰后96 h细胞存活率最低,与阴性对照组比较差异有显著性(P<0.001);干扰后24,48,72,96h干扰组凋亡分别为(3.95±0.45)%,(6.23±1.11)%,(10.00±0.30)%,(3.07±0.40)%,干扰后72 h凋亡率最高,与正常对照组和阴性对照组比较差异有显著性(P<0.001).结论 化学转染法成功转染并抑制了FRα在食管癌细胞株EC109中的表达,干扰后细胞增殖受抑制,凋亡增加.
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