【摘 要】
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目的：改造氧化硫硫杆菌的质粒 pTt12,建立一个既能在氧化硫硫杆菌中复制又能在大肠杆菌中复制的穿梭质粒,为用基因工程改造在细菌浸矿、环境保护中使用的工业菌株提供实验根据
【机 构】
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三门峡市卫生学校 河南 三门峡 472143
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目的：改造氧化硫硫杆菌的质粒 pTt12,建立一个既能在氧化硫硫杆菌中复制又能在大肠杆菌中复制的穿梭质粒,为用基因工程改造在细菌浸矿、环境保护中使用的工业菌株提供实验根据.方法首先进行氧化硫硫杆菌(Thiobacillusthiooxidans-1)的pTt12质粒的限制性内切酶 XhoⅠ、PvuⅡ、BglⅡ、HindⅢ、EcoRⅠ、PstⅠ、BamHⅠ和 SalⅠ酶切分析,构建质粒 pTt12的物理图谱.通过 pBR325质粒(E．coli)的 SalⅠ切点和 pTt12质粒的 XhoⅠ切点进行了体外重塑,构成了一个分子量为12．71Md 的杂合质粒pSD125,并成功地转入了大肠杆菌 HB101菌种.结论经分子量测定、酶切分析、转化试验证明,pSD125质粒确系 pBR325和 pTt12重组而成,且能在大肠杆菌 HB101和Thiobacillusthiooxidans-1中转化克隆.
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