【摘 要】
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[目的]探索基于数字PCR的小麦基因拷贝数分析技术,提高目标基因拷贝数的分析通量,促进小麦基因组研究及基因工程研究.[方法]采用中国农业科学院作物科学研究所小麦抗逆分子育
【机 构】
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山西农业大学农学院,中国农业科学院作物科学研究所,中央民族大学,石家庄市农林科学研究院
【基金项目】
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国家重点研发计划(2016YFD0101802),谷子氮素高效利用重要基因克隆及价值评估(2018ZX08009-17B)
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[目的]探索基于数字PCR的小麦基因拷贝数分析技术,提高目标基因拷贝数的分析通量,促进小麦基因组研究及基因工程研究.[方法]采用中国农业科学院作物科学研究所小麦抗逆分子育种课题组创制的高抗小麦黄花叶病转nib8小麦为试验材料,使用小麦D基因组中的单拷贝纯合内源基因PINb-D1b(籽粒硬度基因)为内参基因,根据转化的抗病基因nib8序列设计4对特异性引物及相应探针,通过试验确定探针和引物的最优浓度,优化体系的退火温度,寻找最合适的模板浓度.然后用数字PCR检测转nib8小麦中外源基因的拷贝数;同时用Rea
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