一种嗜热型碳酸酐酶基因的克隆表达及酶学性质

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本文将嗜热茵Methanocella conradii HZ254的β型碳酸酐酶基因mtc在大肠杆菌中进行了克隆和表达。将PCR扩增得到mtc基因与pET-24a(+)载体进行连接,转入大肠杆菌JM109中,得到工程菌JM109-pET24a-mtc。诱导表达后做SDS-PAGE电泳,显示有与预期分子量大小相近的(约29kDa)产物条带。该表达产物具有催化CO2水合的活性,但没有酯酶活力。研究表明,重组酶在40℃下稳定,40℃~60℃对酶有激活作用,65℃以上会导致酶的失活。在pH7.0时,酶有最好的pH
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