【摘 要】
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目的:建立检测给药食蟹猴血清中重组人表皮生长因子-白介素-18(rhEGF-IL-18)融合蛋白含量的直接竞争ELISA方法,为该融合蛋白的动力学研究提供方法学。方法:用棋盘法确定包被
【机 构】
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温州医科大学检验医学院、生命科学学院; 山东弘立医学动物实验研究有限公司;
【基金项目】
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浙江省重大科技专项(2009C13038);浙江省临床检验诊断学重中之重学科和浙江省重点科技创新团队资助项目(2010R50048)
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目的:建立检测给药食蟹猴血清中重组人表皮生长因子-白介素-18(rhEGF-IL-18)融合蛋白含量的直接竞争ELISA方法,为该融合蛋白的动力学研究提供方法学。方法:用棋盘法确定包被抗体和酶标抗原工作浓度,建立直接竞争ELISA方法,并对其进行方法学评价。结果:包被抗体和酶标抗原的最适工作浓度为4μg/mL和1:1 000。建立的标准曲线的曲线范围为100~900 ng/mL,R2为0.9898;日内精密度和日间精密度的最大变异系数分别为2.42%和2.20%;回收率95.3%~103.0%;样品在室温放置1 h、冻融2次和冻存20 d三种条件下检测结果均较稳定,相对标准差均小于15%;定量下限为20.0 ng/mL。结论:本研究建立的ELISA方法稳定且可行。
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