论文部分内容阅读
目的从质粒pVAE中克隆目的基因Esat6，与hGM—CSF-起构建双顺反子表达载体pIEG，并进行鉴定。方法以质粒pVAE为模板扩增出Esat6基因，与pIRES的MCSA进行重组，构建pIEsat6重组质粒。然后再以pORF—hGM—CSF为模板扩增出hGM—CSF基因，与pIRES载体的MCSB进行重组，构建pIGM重组质粒，上述两重组质粒经PCR、限制性内切酶图谱及DNA序列测定分析等多种方法进行鉴定后，再通过酶切、连接把hGM—CSF构建于pIEsat6质粒中，形成双顺反子真核表达载体pIEG。