【摘 要】
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目的 探讨Wrap53调控p53基因表达对人非小细胞肺癌H322细胞放射敏感性的影响及分子机制.方法 选取中国科学院上海细胞生物研究所细胞库的人非小细胞肺癌H322细胞(p53突变型),
【机 构】
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福建省宁德市闽东医院放疗科,宁德355000
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目的 探讨Wrap53调控p53基因表达对人非小细胞肺癌H322细胞放射敏感性的影响及分子机制.方法 选取中国科学院上海细胞生物研究所细胞库的人非小细胞肺癌H322细胞(p53突变型),构建Wrap53-shRNA干扰质粒,将phWrap53-shRNA转染至H322细胞,RT-PCR、Western Blotting H322检测Wrap53、Mtp53的mRNA及蛋白的表达;克隆形成实验计算准阈剂量(Dq),平均致死剂量(D0)和照射2Gy时细胞的存活率(SF2)等放射敏感性参数值.采用流式细胞仪检测细胞周期变化.结果 与未转染组和sh-NC组比较,phWrap53-shRNA组细胞Wrap53和Mtp53的mRNA和蛋白表达水平均下降;phWrap53-shRNA组Do、Dq值和SF2值均低于sh-NC组,差异均有统计学意义(均P ＜0.05),放射增敏比(SER)为(1.468±0.023).与sh-NC组相比,phWrap53-shRNA组在G1期阻滞增加,且以24 h时最显著;Wrap53干扰后在放射16 h和24 h后的G2/M期阻滞明显减少,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 干扰Wrap53的表达增加了人非小细胞肺癌H322细胞的放射敏感性,可能与抑制Mtp53基因的表达和改变放射后的细胞周期时相有关,有望成为增加肿瘤细胞放射敏感性的一个潜在靶点.
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