【摘 要】
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目的 探讨基质细胞源性因子-1(SDF-1)/CXC趋化因子受体-4(CXCR4)轴对髓核细胞细胞凋亡的影响及其机制.方法 体外培养大鼠髓核细胞,应用不同浓度的SDF-1α与CXCR4拮抗剂AMD310
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科, 武汉,430022
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目的 探讨基质细胞源性因子-1(SDF-1)/CXC趋化因子受体-4(CXCR4)轴对髓核细胞细胞凋亡的影响及其机制.方法 体外培养大鼠髓核细胞,应用不同浓度的SDF-1α与CXCR4拮抗剂AMD3100进行干预;流式细胞仪检测细胞的凋亡,噻唑蓝(MTT)实验检测对细胞增殖的影响,半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、-8、-9酶活性试剂盒检测Caspase-3、-8、-9酶活性,Western blot法检测细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)同源拮抗剂(bak)表达.结果 SDF-1α(0、50、100、150 μg/L)呈浓度依赖性促进髓核细胞凋亡,凋亡率分别为(5.278±0.562)%、(10.327±1.216)%、(18.634 ±2.632)%、(28.376 ±3.561)%;随SDF-1α浓度的升高,细胞活力明显受抑制,细胞活力为(99.72±0.49)%、(87.26±1.85)%、(75.79±2.89)%、(61.05±4.17)%,(P<0.01).随SDF-1α浓度的升高,Caspase-3、-9酶的活性明显增加、bak蛋白的表达明显增加(P<0.05).SDF-1α与AMD3100联合应用处理髓核细胞,与单独使用SDF-1α相比,细胞凋亡明显减少、细胞活力明显增加、Caspase-3和-9酶的活性明显降低、bak蛋白的表达明显减少(P<0.05).结论 SDF-1α促进大鼠髓核细胞的凋亡、抑制其增殖,作用机制为上调bak蛋白的表达,进而内源性凋亡途径的激活.
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