筛选G-box结合蛋白的酵母单杂交文库的构建

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：belive

【摘要】

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目的：筛选花青素合成中的关键基因查尔酮合成酶基因CHS启动子中G-box的结合蛋白,从而找到调节CHS表达的转录因子。方法：采用Matchmaker Gold Yeast One-Hybrid Library Screeni

【作者】

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杨鹏程周波李玉花

【机构】

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东北林业大学生命科学学院

【出处】

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生物技术通讯

【发表日期】

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2012年4期

【关键词】

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花青素查尔酮合成酶 G-BOX 酵母单杂交转录因子 anthocyanin chalcone synthase G-box yeast one-hyb

【基金项目】

：

基金项目：国家自然科学基金（30800082,30730078）,高等学校博士学科点专项科研基金（200802251039）,中国博士后科学基金（20090460868,201003409）,东北林业大学青年拔尖人才支持计划（YTTP-1011-17）

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目的：筛选花青素合成中的关键基因查尔酮合成酶基因CHS启动子中G-box的结合蛋白,从而找到调节CHS表达的转录因子。方法：采用Matchmaker Gold Yeast One-Hybrid Library Screening System,将CHS启动子G-box序列串联后整合入酵母染色体,构建诱饵菌株;采用SMART技术合成芜菁幼苗下胚轴cDNA,将该cDNA与pGADT7-Rec表达载体共同转化诱饵菌株,通过同源重组在酵母细胞内同步进行cDNA文库的构建和筛选;用酵母菌落PCR法获得阳性克隆中的c

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