【摘 要】
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目的 检测软骨脱细胞基质(ACM)对软骨细胞的生物学作用,探讨其作为软骨组织工程支架的可行性.方法 切取健康的雄性日本大耳白兔膝关节的软骨,经低温粉碎成软骨颗粒,通过多步
【机 构】
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哈尔滨医科大学附属二院 整形手外科, 黑龙江 哈尔滨,150086
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目的 检测软骨脱细胞基质(ACM)对软骨细胞的生物学作用,探讨其作为软骨组织工程支架的可行性.方法 切取健康的雄性日本大耳白兔膝关节的软骨,经低温粉碎成软骨颗粒,通过多步骤酶方法将软骨颗粒行脱细胞处理,并用含20%胎牛血清的DMEM研磨制成ACM液.再切取兔膝关节的软骨,制成碎屑后分离培养软骨细胞.取培养第2、3代的软骨细胞,分成对照A组和B、C、D3个实验组(分别加入0.5、1.0、5.0ms/ml的ACM液).采用MTT法检测软骨细胞的活力,测定糖胺多糖的含量,以及H-胸腺嘧啶(3H-TdR)和3H-脯氨酸(3H-Pro)掺人法测定软骨细胞的增殖情况和胶原的合成能力.结果 ACM扫描电镜观察软骨巢内软骨细胞消失.软骨细胞在ACM液中生长良好,形态正常.B、C、D与A组相比,软骨细胞的生长活力分别增加了7.73%、13.50%、16.5%(P<0.05或P0.05);而C、D组比A组增加了51.15%、62.68%(P<0.05或P<0.01).软骨细胞3H-TdR和3H-Pro掺入后,在B、C、D组中细胞的增殖及合成的胶原与A组相比,其差异均有统计学意义(P<0.01).结论 ACM能够提高软骨细胞的生长活力,增加糖胺多精的含量,刺激软骨细胞的增殖和胶原的合成,是可供选择的组织工程支架材料之一.
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