弱阳离子交换毛细管液相色谱整体柱的制备及其对蛋白质的分离

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毛细管液相色谱柱具有节省样品、流动相,固定相消耗少,提高检测灵敏度等优点。近年来,随着蛋白组学的发展,毛细管离子交换液相色谱受到重视。目前蛋白组学中占有重要地位的多维液相色谱-质谱联用技术中,第一维液相色谱大多采用毛细管离子交换色谱柱。目前采用的颗粒填充毛细管柱柱压较高,易被蛋白质污染,且价格昂贵,使用寿命短。整体柱具有大孔结构,柱背压低,对流传质使传质速率加快,制备过程简单,由于溶质与基质的接触时间短,降低了生物样品失活的可能性。与强阳离子交换固定相相比较,弱阳离子交换固定相与生物分子的相互作用比较温和,因此不易发生蛋白质变性现象。目前报道的弱阳离子交换整体柱通常采用两步法改性:先用乙二胺处理,再用氯乙酸反应。我们在选取的具有良好刚性和渗透性的整体固定相上,利用亚胺乙二酸进行一步改性,简化了合成步骤,获得了具有羧酸基团的弱阳离子交换毛细管整体柱,并考察了其对于蛋白的分离能力。
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